pAb di coniglio Anti-AKT1S1/PRAS40 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q96B36

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AKT1S1/PRAS40

• AKT1S1/PRAS40 (substrato 1 di AKT1 ricco di prolina) è anche noto come substrato di AKT ricco di prolina da 40 kDa (PRAS40), è codificato dal gene AKT1S1 e produce una proteina di ~27 kDa (UniProt: Q96B36); lo splicing alternativo genera molteplici varianti di trascritto.
• Agisce come regolatore negativo di mTORC1, inibendo l'attività chinica occupando il sito di reclutamento dei substrati di MTOR (PubMed:17277771, PubMed:17386266, PubMed:17510057, PubMed:29236692).
  Riferimenti correlati: PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057, PMID:29236692
• Dopo stimolazione con insulina o nutrienti, AKT1S1 diviene iperfosforilato e si dissocia da mTORC1, rimuovendo l'inibizione e permettendo alla via di segnalazione di mTORC1 di proseguire (PubMed:17386266, PubMed:18372248).
  Riferimenti correlati: PMID:17386266, PMID:18372248
• La funzione inibitoria di AKT1S1 è essa stessa regolata dalla fosforilazione e dal successivo legame con le proteine 14-3-3, che promuovono la sua dissociazione dal complesso (PubMed:16174443, PubMed:18372248).
  Riferimenti correlati: PMID:16174443, PMID:18372248
• La proteina è localizzata prevalentemente nel citoplasma/citosolo, in linea con il suo ruolo nella modulazione dell'attività di mTORC1 nei siti lisosomiali e citosolici.
• AKT1S1 è ampiamente espresso in tutti i tessuti, con i livelli più alti nel fegato e nel cuore; l'espressione è spesso elevata nelle linee cellulari di cancro (ad esempio A-549, HeLa) rispetto alle linee normali.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione su molteplici residui di serina/treonina e la metilazione; questi eventi influenzano la sua attività e le sue interazioni.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (peptide sintetico, aa 150-256) bersaglia una regione centrale di AKT1S1 umano; assicurati che il tuo campione esprima la proteina full-length o le isoforme che contengono questo epitopo per evitare falsi negativi.
• Per il Western blotting, AKT1S1 migra a circa 27 kDa; considera di utilizzare un controllo positivo come lisato di HeLa o A-549 e convalida la specificità della banda con peptide di blocco o siRNA se necessario.
• In IHC-P e IF/ICC, tieni conto della localizzazione citoplasmatica di AKT1S1; la permeabilizzazione e il recupero dell'antigene possono essere necessari per una rilevazione ottimale.
• Questo anticorpo è risultato adatto per ELISA; esegui titolazioni a scacchiera per determinare le condizioni ottimali di coating e rilevazione per la tua specifica configurazione di saggio.

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