Anticorpo policlonale coniglio anti-AKT1S1/PRAS40 per WB, ELISA - Q96B36

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AKT1S1/PRAS40

• AKT1S1/PRAS40, anche designato substrato AKT ricco di prolina da 40 kDa, è un regolatore negativo del bersaglio meccanistico della rapamicina complesso 1 (mTORC1), un sensore centrale di nutrienti che guida la crescita cellulare anabolica. Riferimenti correlati: PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057
• In condizioni di scarsità di nutrienti, AKT1S1 si associa a mTORC1 e inibisce direttamente la sua attività bloccando il reclutamento del substrato. Riferimenti correlati: PMID:29236692
• La segnalazione dell'insulina e dei nutrienti porta alla fosforilazione di AKT1S1, causando la sua dissociazione da mTORC1 e il legame alle proteine 14-3-3, alleviando così l'inibizione di mTORC1. Riferimenti correlati: PMID:17386266, PMID:18372248, PMID:16174443
• AKT1S1 è una fosfoproteina soggetta a metilazione; lo splicing alternativo produce multiple isoforme e la sua struttura 3D è stata risolta.
• La proteina localizza nel citoplasma e nel citosol.
• AKT1S1 è espresso ampiamente, con i livelli più alti nel fegato e nel cuore, ed è upregolato in determinate linee cellulari tumorali (es. A-549, HeLa) rispetto alle linee cellulari normali (es. HEK293).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 150–256) targeting una regione centrale di AKT1S1; le prestazioni possono variare tra le varianti di splicing: convalidare in modelli cellulari umani pertinenti.
• Per il Western blot, è prevista una banda vicino a 27 kDa; considerare l'uso di lisato di fegato o cuore umano come controllo positivo, data l'alta espressione in questi tessuti.
• Potrebbero verificarsi spostamenti di mobilità dipendenti dalla fosforilazione; il trattamento dei campioni con fosfatasi potrebbe confermare l'identità della banda.
• Per l'ELISA, eseguire titolazioni a scacchiera per ottimizzare le concentrazioni dell'antigene di rivestimento e dell'anticorpo.

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