Anticorpo policlonale Anti-ALG1 di coniglio per WB, ELISA - Q9BT22

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Chitobiosildifosfodolicolo beta-manosiltransferasi

• La chitobiosildifosfodolicolo beta-manosiltransferasi (ALG1), chiamata anche omologo della proteina di glicosilazione legata all'asparagina o mannosiltransferasi-1 (MT-1), è un enzima umano codificato dal gene ALG1 (alias HMAT1, HMT1). Svolge un ruolo fondamentale nelle prime fasi della N-glicosilazione proteica.
• ALG1 funziona come glicosiltransferasi nella via biosintetica dell'oligosaccaride legato al dolicolo (DLO), che assembla il precursore del glicano legato ai lipidi necessario per la N-glicosilazione dell'asparagine (N). Questa via inizia sulla superficie citosolica della membrana del reticolo endoplasmatico (ER) e si completa nel lume dell'ER.
• In particolare, ALG1 catalizza il trasferimento del primo residuo di mannosio dal GDP-mannosio all'intermedio GlcNAc₂-PP-dolicolo sulla faccia citoplasmatica dell'ER, ottenendo l'oligosaccaride centrale Man₁GlcNAc₂-PP-dolicolo. Questo passaggio è essenziale prima delle successive aggiunte di mannosio da parte di ALG2 e altri enzimi a valle.
• La proteina si localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico, coerentemente con il suo ruolo nella fase citosolica iniziale dell'assemblaggio del DLO.
• ALG1 è una proteina transmembrana a passaggi multipli, dotata di un'ancora di segnale e più eliche transmembrana. Appartiene alla famiglia delle glicosiltransferasi ed è soggetta a fosforilazione (parole chiave UniProt: Reticolo endoplasmatico, Glicosiltransferasi, Membrana, Ancora di segnale, Transmembrana, Elica transmembrana, Fosfoproteina).
• Lo splicing alternativo produce diverse isoforme e le mutazioni in ALG1 sono associate a malattie congenite della glicosilazione (CDG1K), a conferma della sua funzione cruciale nella glicobiologia.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un frammento ricombinante che copre i residui 215‑464 dell'ALG1 umano, che copre una porzione consistente del dominio citosolico dell'enzima. Questa regione è conservata tra uomo, topo e ratto, e supporta la reattività crociata dell'anticorpo con queste specie.
• Per Western blot (WB), ci si aspetta che l'ALG1 endogeno migri a circa 53 kDa. L'anticorpo può rilevare bande aggiuntive dovute a varianti di glicosilazione o prodotti di scissione; si raccomanda la convalida nel sistema di campione pertinente.
• Questo anticorpo policlonale è adatto per applicazioni ELISA. Si consiglia di utilizzarlo come reagente di cattura o di rilevazione dopo l'ottimizzazione con il formato di saggio specifico e la fonte di antigene.
• Come reagente policlonale, è necessario verificare la coerenza lotto per lotto per i lavori quantitativi. Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati (ad es. linee cellulari con espressione di ALG1 nota o lisati di knockout).

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