Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ALIX per WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q8WUM4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ALIX

• ALIX (proteina interagente con la morte cellulare programmata 6), nota anche come AIP1, HP95, DRIP4 e MCPH29, è codificata dal gene PDCD6IP ed esiste in più isoforme grazie allo splicing alternativo.
• È una proteina VPS di classe E essenziale per la biogenesi dei corpi multivesicolari (MVB), concentrando e ordinando il carico per la formazione delle vescicole intralumenali tramite la via ESCRT. Riferimenti bibliografici: PMID:14739459
• ALIX si lega al fosfolipide lisobisfosfatidico acido (LBPA) sulle membrane interne dei MVB e funge da adattatore per un sottoinsieme di proteine ESCRT-III, come CHMP4B.
• La proteina è necessaria per la citochinesi, e funziona nella fase di abscissione attraverso eventi di fissione della membrana topologicamente equivalenti. Riferimenti bibliografici: PMID:17556548 PMID:17853893 PMID:18641129
• In sinergia con SDC1/4 e SDCBP, ALIX regola la biogenesi degli esosomi, influenzando la comunicazione intercellulare. Riferimenti bibliografici: PMID:22660413
• Subcellolarmente, ALIX si localizza nel citosol, nei melanosomi, nei centrosomi, nelle giunzioni strette e nell'anello del corpo centrale, ed è secreta negli esosomi extracellulari.
• Partecipa alle interazioni ospite-virus, facilitando la gemmazione dell'HIV-1 interagendo con CHMP4B, e può svolgere ruoli nell'apoptosi e nel mantenimento della barriera epiteliale.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e metilazione, che influenzano le sue attività multifunzionali.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo è una proteina ricombinante; si tenga conto che l'anticorpo può riconoscere ALIX sia nativa che denaturata a seconda dell'applicazione.
• Per Western blot (WB), validare nel vostro specifico sistema di campioni e ottimizzare il caricamento delle proteine per rilevare la banda di 96 kDa; si noti che le modifiche post-traduzionali possono causare lievi spostamenti di mobilità.
• Negli esperimenti IF/ICC, i metodi di fissazione e permeabilizzazione possono influenzare la colorazione dei diversi pool di ALIX (citosolico, centrosomiale, corpo centrale); si consiglia di testare diversi protocolli.
• Per IP, confermare la compatibilità dell'anticorpo con il vostro tampone di lisi e garantire l'arricchimento del bersaglio eseguendo controlli paralleli.
• Quando si utilizza l'ELISA, includere controlli positivi (proteina ricombinante) e negativi appropriati per valutare sensibilità e specificità.

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