Anticorpo Policlonale Anti-ALK per WB, IF/ICC, ELISA - Q9UM73

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ALK

• ALK (Anaplastic lymphoma kinase, chinasi del linfoma anaplastico, noto anche come CD246 o ALK1) è una tirosin-chinasi recettoriale neuronale che è espressa in modo essenziale e transitorio in specifiche regioni del sistema nervoso centrale e periferico, dove svolge un ruolo cruciale nella genesi e nella differenziazione del sistema nervoso.
  Riferimenti correlati: PMID:11121404, PMID:11387242, PMID:16317043
• ALK agisce come proteina chiave per la magrezza: nei neuroni ipotalamici, controlla il dispendio energetico regolando negativamente la lipolisi del tessuto adiposo bianco e il tono simpatico per regolare finemente l'omeostasi energetica (per similarità).
• Dopo il legame con il ligando (in particolare ALKAL2), ALK dimerizza e subisce l'autofosforilazione sul suo dominio chinasi intracellulare, innescando l'attivazione a valle della via della proteina chinasi attivata da mitogeni (MAPK) e di altre cascate di segnalazione.
  Riferimenti correlati: PMID:30061385, PMID:33411331, PMID:34646012, PMID:34819673
• ALK recluta e fosforila le proteine adattatrici IRS1, SHC1, FRS2 e CBL, portando all'attivazione di NF-kappa-B e della serina/treonina chinasi AKT, che promuove la sopravvivenza e la proliferazione cellulare.
  Riferimenti correlati: PMID:15226403, PMID:16878150, PMID:12122009
• ALK si localizza sulla membrana cellulare (annotazione UniProt) ed è espresso nel cervello, nel sistema nervoso centrale, nell'intestino tenue e nei testicoli, ma non nelle cellule linfoidi normali.
• ALK è classificato come proto-oncogene ed è associato a riarrangiamenti cromosomici nel cancro. È una glicoproteina con una singola elica transmembrana e un dominio tirosin-chinasi intracellulare.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai residui 1521–1620 vicino all'estremità C-terminale dell'ALK umano (NP_004295.2). Per Western blotting è attesa una banda di circa 176 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e convalidare con una linea cellulare o un lisato tissutale positivo per ALK noto.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per rilevare ALK localizzato sulla membrana; si consiglia di utilizzare linee cellulari con espressione di ALK confermata.
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale può fornire un'ampia copertura di epitopi, ma le condizioni di saggio e i metodi di rivestimento devono essere determinati sperimentalmente.
• Quando si utilizzano campioni di topo, confermare l'omologia di sequenza della regione dell'immunogeno, poiché la reattività crociata è dichiarata ma le prestazioni dell'anticorpo possono variare.
• Come per ogni anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità tra lotti; si raccomanda di includere controlli positivi e negativi appropriati per ogni esperimento.

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