Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfatasi Alcalina (ALPL) per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P05186

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Fosfatasi Alcalina (ALPL)

• La fosfatasi alcalina, isoenzima non specifico tessutale (ALPL), nota anche come fosfatasi alcalina fegato/ossa/rene, è codificata dal gene ALPL e appartiene alla famiglia delle fosfatasi alcaline.
• Funziona come idrolasi con ampia specificità di substrato, defosforilando composti come pirofosfato inorganico (PPi), piridossale 5′-fosfato (PLP) e N-fosfocreatina. Riferimenti correlati: PMID:12162492, PMID:2220817
• Essenziale per la mineralizzazione scheletrica e dentale attraverso l'idrolisi del PPi extracellulare, un inibitore della mineralizzazione, in fosfato, promuovendo così la formazione di cristalli di idrossiapatite. Riferimenti correlati: PMID:23688511, PMID:25982064
• Catalizza la defosforilazione del PLP in piridossale, la forma trasportabile della vitamina B6, critica per la sintesi dei neurotrasmettitori nel cervello. Riferimenti correlati: PMID:20049532, PMID:2220817
• Si localizza alla membrana cellulare tramite un ancoraggio GPI e si associa anche a vescicole extracellulari, membrana mitocondriale e spazio intermembrana, mediando il metabolismo localizzato del fosfato.
• Modificata post-traduzionalmente con glicosilazione, ponti disolfuro e siti di legame per zinco e magnesio, essenziali per la sua attività catalitica.
• Le mutazioni in ALPL sono collegate all'ipofosfatasia, una malattia metabolica ossea, riflettendo il suo ruolo chiave nella biomineralizzazione.
• Inoltre, ALPL può defosforilare prodotti microbici come lipopolisaccaridi (LPS), suggerendo un ruolo nella modulazione delle risposte immunitarie innate. Riferimenti correlati: PMID:28448526

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, considerare una diluizione iniziale di 1:500–1:2000 e validare in lisati di tessuto umano, topo o ratto che esprimono ALPL, come osso, fegato o rene.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), il recupero dell'antigene con tampone citrato può migliorare il segnale; testare in tessuti noti positivi come osteoblasti o epatociti.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), includere un'adeguata permeabilizzazione e validare la colocalizzazione con marcatori di membrana o vescicole extracellulari.
• Per ELISA, abbinare a un anticorpo di rilevamento corrispondente e testare con proteina ALPL ricombinante o campioni biologici contenenti attività fosfatasi alcalina.
• L'immunogeno copre gli amminoacidi 120–260, situati all'interno del dominio catalitico; l'anticorpo può riconoscere sia le forme legate alla membrana che quelle solubili.
• A causa dell'alta omologia tra le specie, è prevista la reattività incrociata con topo e ratto, ma validare sempre nel proprio specifico sistema di campionamento.

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