Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Fosfatasi Alcalina (ALPL) per WB, IHC-P, ELISA - P05186

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Fosfatasi Alcalina (ALPL)

• La fosfatasi alcalina, isoforma non specifica per tessuto (ALPL), nota anche come isoforma fegato/osso/rene, esiste in più isoforme grazie allo splicing alternativo ed è ampiamente espressa nei tessuti osseo, epatico e renale.
• Svolge un ruolo essenziale nella mineralizzazione scheletrica e dentale idrolizzando il difosfato (PPi) extracellulare, un potente inibitore della mineralizzazione, in fosfato, promuovendo così la formazione di cristalli di idrossiapatite e aumentando la concentrazione di fosfato inorganico. Riferimenti correlati: PMID:23688511 PMID:25982064
• Ha una specificità di substrato ampia, ma solo pochi substrati sono naturali, come il pirofosfato inorganico (PPi), il piridossale 5'-fosfato (PLP) e la N-fosfocreatina. Riferimenti correlati: PMID:12162492 PMID:2220817
• Catalizza la defosforilazione del piridossale 5'-fosfato (PLP) in piridossale, la forma trasportabile della vitamina B6, essenziale per la sintesi di neurotrasmettitori nel cervello. Riferimenti correlati: PMID:20049532 PMID:2220817
• È in grado di defosforilare prodotti microbici, come lipopolisaccaridi (LPS) e poli-inosina:citosina (poly I:C), potenzialmente modulando le risposte immunitarie innate. Riferimenti correlati: PMID:28448526
• Agisce come regolatore chiave della termogenesi adattiva come parte del ciclo inutile della creatina nei mitocondri delle cellule adipose termogeniche, idrolizzando la N-fosfocreatina per dissipare energia sotto forma di calore senza svolgere lavoro meccanico o chimico.
• La proteina è una proteina di membrana glicosilata ancorata a GPI, che richiede cofattori zinco e magnesio; si localizza sulla membrana cellulare, sulla membrana delle vescicole extracellulari e sulla membrana mitocondriale, e le mutazioni del gene ALPL causano l'ipofosfatasia.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 230-440 dell'ALPL umano, all'interno della regione centrale della proteina matura. Poiché l'ALPL subisce splicing alternativo, assicurati che l'epitopo sia presente nell'isoforma di tuo interesse.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 57 kDa; tuttavia, la glicosilazione e altre modifiche post-traduzionali possono causare uno shift della banda osservata verso un peso molecolare apparente più alto. Utilizza lisati di controllo positivo da tessuti ossei, epatici o renali, o linee cellulari che sovraesprimono ALPL.
• Per l'immunistochimica (IHC-P), ottimizza le condizioni di recupero dell'antigene (ad esempio, il recupero epitopico indotto da calore) e convalida la specificità della colorazione utilizzando controlli di tessuto ALPL-deficiente o knockout, se disponibili.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; titola le concentrazioni di anticorpo contro la proteina ALPL ricombinante o campioni naturali per determinare le diluizioni di lavoro ottimali.
• Come per ogni anticorpo policlonale, le prestazioni possono variare tra i lotti; considera di convalidare nuovi lotti nel tuo contesto sperimentale specifico.

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