Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-ALKBH1 per WB, IP, IF/ICC, ELISA - Q13686

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ALKBH1

• ALKBH1 è una dioxygenasi nucleica dipendente da Fe(II), α-chetoglutarato e ossigeno molecolare, ed è l'omologo umano dell'AlkB di E. coli.
  Riferimenti correlati: PMID:18603530, PMID:27497299
• Media la demetilazione della N(1)-metiladenina (m1A) alla posizione 58 di diversi RNA di trasferimento (tRNA), regolando l'inizio e l'allungamento della traduzione in condizioni di deprivazione di glucosio.
  Riferimenti correlati: PMID:27745969
• Nei mitocondri, ALKBH1 ossida specificamente la 5-metilcitozina (m5C) alla posizione 34 del mt-tRNA(Met) a 5-formilcitozina (f5C), ampliando il riconoscimento dei codoni durante la traduzione mitocondriale.
  Riferimenti correlati: PMID:27497299
• ALKBH1 agisce come DNA N6-metiladenina (6mA) demetilasi a livello dei retrotransposoni L1 nelle cellule staminali embrionali, contribuendo potenzialmente al silenziamento epigenetico.
  Riferimenti correlati: PMID:30017583, PMID:30392959
• Demethyla anche la N(3)-metilcitidina (m3C) nell'mRNA, ampliando il suo ruolo nella modifica dell'RNA.
  Riferimenti correlati: PMID:31188562
• Inoltre, ALKBH1 possiede attività di DNA liasi che taglia il DNA in siti abasici indipendentemente dalla sua funzione di dioxygenasi, generando rotture a doppio filamento.
  Riferimenti correlati: PMID:19959401, PMID:23577621
• ALKBH1 si localizza sia nel nucleo che nei mitocondri, compartimentando le sue diverse funzioni di modifica degli acidi nucleici.
• Espresso in modo ubiquitario in tutti i tessuti umani, ALKBH1 può svolgere anche un ruolo nella differenziazione della linea trofoblastica placentare.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 290-389 di ALKBH1 umano. Immunogeni alternativi che bersagliano altre regioni possono generare anticorpi con diverse specificità per epitopi.
• Per il Western blotting, in condizioni riducenti ci si aspetta una banda corrispondente al peso molecolare previsto di ~44 kDa. Verificare la specificità della banda utilizzando controlli adeguati.
• Nell'immunoprecipitazione, l'anticorpo può potenzialmente catturare proteine ALKBH1 umane, murine e di ratto; ottimizzare il rapporto anticorpo/lisato.
• Per immunofluorescenza/ICC, studi di co-localizzazione con marcatori specifici per organuli possono confermare la distribuzione nucleare e mitocondriale di ALKBH1.
• Nelle applicazioni ELISA, l'uso della proteina o del peptide ricombinante ALKBH1 come antigene di cattura può migliorare le prestazioni; titolare l'anticorpo per ottenere una sensibilità ottimale.

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