Anticorpo Monoclonale Anti-ALKBH1 di Coniglio per WB, IP, IHC-P, ELISA - Q13686

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ALKBH1

• ALKBH1 è una diossigenasi degli acidi nucleici che agisce su DNA e tRNA, richiedendo ossigeno molecolare, alfa-chetoglutarato e ferro. Riferimenti correlati: PMID:18603530, PMID:27497299
• Funziona principalmente come una tRNA demetilasi, rimuovendo la N1-metiladenina (m1A) dai tRNA, specialmente in posizione 58 (m1A58), regolando l'inizio e l'elongazione della traduzione in risposta alla privazione di glucosio. Riferimenti correlati: PMID:27745969
• Nei mitocondri, ALKBH1 ossida il mt-tRNA(Met) alla citosina 34 per formare 5-formilcitosina (f5C), espandendo il riconoscimento dei codoni per AUA/AUG. Riferimenti correlati: PMID:27497299
• Demetila la N6-metiladenina (m6A) del DNA negli elementi L1 nelle cellule staminali embrionali, potenzialmente silenziandoli. Riferimenti correlati: PMID:30017583, PMID:30392959
• Demetila la modifica dell'mRNA N3-metilcitidina (m3C). Riferimenti correlati: PMID:31188562
• Possiede anche attività liasica del DNA, introducendo rotture a doppio filamento in siti abasici indipendentemente da alfa-chetoglutarato e ferro, formando un addotto covalente. Riferimenti correlati: PMID:19959401, PMID:23577621
• Localizzazione subcellulare: Nucleo e mitocondri.
• Espresso ubiquitariamente; potrebbe svolgere un ruolo nella differenziazione del lignaggio dei trofoblasti placentari (Per somiglianza).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–100), suggerendo il riconoscimento della proteina nativa a lunghezza intera e potenzialmente di alcuni isoformi contenenti questa regione. Convalidare la specificità nel sistema di campioni rilevante.
• Per il Western blot, aspettarsi una banda a circa 44 kDa. Utilizzare controlli di caricamento appropriati e confermare la reattività incrociata con lisati umani, di topo e di ratto.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), sono raccomandati pre-clearing e rapporti anticorpo-lisato ottimizzati per minimizzare il legame aspecifico.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene potrebbero richiedere ottimizzazione a causa della localizzazione nucleare/mitocondriale. Considerare di testare sia il recupero standard con citrato che quello basato su EDTA.
• In ELISA, abbinare a un anticorpo di rilevamento che riconosca un epitopo diverso se si sviluppa un saggio sandwich, e convalidare linearità e sensibilità con standard proteici ricombinanti o peptidici.

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