Anticorpo policlonale coniglio anti-ALOX12B per WB, ELISA - O75342

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ALOX12B

• ALOX12B (ARCI2, 12R-LOX) è un arachidonato 12-lipossigenasi, di tipo 12R, noto anche come lipossigenasi 12 di tipo epidermico, appartenente alla famiglia delle lipossigenasi.
• Catalizza l'incorporazione regiono- e stereo-specifica di ossigeno molecolare in acidi grassi polinsaturi liberi ed esterificati per generare idroperossidi lipidici, che vengono successivamente ridotti a derivati idrossilati.
  Riferimenti correlati:
  PMID:21558561 PMID:9618483 PMID:9837935
• Nella pelle, agisce a monte di ALOXE3 sul gruppo linoleato di ceramidi EOS (ω-idrossiacil-sfingosina) esterificate per produrre un derivato epossido-chetone, un passaggio critico per l'attacco covalente delle ω-idrossiceramidi alle proteine dell'involucro dei corneociti.
  Riferimenti correlati:
  PMID:21558561
• Questa cascata enzimatica è essenziale per la formazione dell'involucro lipidico dei corneociti e per l'istituzione della barriera di permeabilità epidermica, prevenendo l'eccessiva perdita transepidermica di acqua.
  Riferimenti correlati:
  PMID:21558561
• Può anche regolare l'espressione delle mucine delle vie aeree, suggerendo un ruolo oltre la pelle.
  Riferimenti correlati:
  PMID:22441738
• Espresso nei linfociti B, nei follicoli piliferi, nei cheratinociti del prepuzio, nella pelle adulta e nei tessuti psoriasici (specificità tissutale UniProt).
• Si localizza nel citoplasma, prevalentemente nella regione perinucleare.
• Parole chiave funzionali: Diossigenasi, legante il ferro, liasi, metabolismo lipidico, ossidoreduttasi; associata all'ittiosi quando mutata.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende i 250 amminoacidi N-terminali di ALOX12B umana; considerare che gli epitopi potrebbero essere parzialmente sepolti se la proteina adotta una conformazione ripiegata, potenzialmente influenzando il rilevamento in condizioni native.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 80 kDa; validare la specificità dell'anticorpo utilizzando lisati di controllo positivi e negativi (es. cellule sovraesprimenti ALOX12B rispetto a knockout).
• Per l'ELISA, testare più concentrazioni di antigene di rivestimento e diluizioni dell'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore; la proteina ALOX12B ricombinante può fungere da standard.
• L'anticorpo cross-reagisce con ALOX12B di topo e ratto; tuttavia, dovrebbe essere verificata l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno e la reattività crociata dovrebbe essere confermata nel tessuto della specie pertinente.
• Nella ricerca cutanea, l'espressione di ALOX12B è più alta nei cheratinociti differenziati; considerare l'uso di modelli equivalenti epidermici o campioni psoriasici per studi funzionali.

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