Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ALOX5 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09917

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ALOX5

• ALOX5 (5-lipossigenasi, 5-LO) catalizza le fasi iniziali della biosintesi dei leucotrieni ossigenando l'acido arachidonico in 5-HPETE e disidratandolo successivamente in LTA4, potenti mediatori dell'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:19022417 PMID:21233389 PMID:22516296

• Inoltre, ALOX5 ossigena l'acido arachidonico in 8-HPETE e 12-HPETE. Riferimenti correlati: PMID:23246375

• Funziona come sintasi delle lipossine, convertendo (15S)-HETE in un tetraene coniugato. Riferimenti correlati: PMID:31664810

• ALOX5 metabolizza l'acido eicosapentaenoico (EPA) e l'acido docosaesaenoico (DHA) in mediatori specializzati pro-risolutivi (SPM), come le resolvine E e D, contribuendo alla risoluzione dell'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:17114001 PMID:21206090 PMID:31664810

• L'enzima è localizzato nel citoplasma, nella matrice nucleare, nella membrana nucleare, nella regione perinucleare, nel citosol e nell'involucro nucleare.

• ALOX5 partecipa all'immunità adattativa regolando le funzioni delle cellule B e delle cellule T follicolari helper e media la produzione di ROS indotta da CD40 nelle cellule B tramite il ruolo di collegamento di PIK3R1. Riferimenti correlati: PMID:21200133

• È una diossigenasi, un'idrolasi e una proteina legante il ferro appartenente alla via biosintetica dei leucotrieni.

• Per similitudine, ALOX5 può svolgere un ruolo nella migrazione delle cellule dendritiche, nella guarigione delle ferite attraverso la regolazione dell'eme ossigenasi-1, nell'adesione dei monociti, nell'omeostasi del glucosio, nella secrezione di insulina, nella mineralizzazione ossea e nella differenziazione delle cellule adipose.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il western blot (WB), si consiglia di utilizzare lisati di cellule intere ottenuti da tessuti o cellule umani, murini o di ratto noti per esprimere ALOX5.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo utilizzando un peptide bloccante o controlli di knockdown/knockout nel sistema campione pertinente.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), testare le condizioni di recupero antigenico e la diluizione dell'anticorpo; utilizzare tessuti con espressione nota di ALOX5 come controlli positivi.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare la fissazione e la permeabilizzazione per preservare sia i segnali di localizzazione citoplasmatica sia quelli di localizzazione nucleare.
• Per l'ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione dopo l'ottimizzazione dell'abbinamento.
• La sequenza dell'immunogeno corrisponde a una regione interna (aa 100–200), pertanto l'anticorpo può riconoscere sia ALOX5 nativa sia ricombinante.

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