Anticorpo policlonale anti-ALOX5 di coniglio per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P09917

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ALOX5

• ALOX5 codifica per la 5-lipossigenasi degli acidi grassi polinsaturi (nota anche come arachidonato 5-lipossigenasi, 5-LO, 5-lipossigenasi), un enzima chiave nella biosintesi dei leucotrieni, potenti mediatori infiammatori, tramite l'ossigenazione dell'acido arachidonico. Riferimenti correlati: PMID:19022417, PMID:21233389, PMID:22516296
• Converte l'arachidonato in 5-idroperossieicosatetraenoato (5-HPETE) e poi in leucotriene A4 (LTA4), e può anche produrre 8-HPETE e 12-HPETE. Riferimenti correlati: PMID:23246375
• ALOX5 mostra attività lipossina sintasi, convertendo il (15S)-HETE in un tetraene coniugato, e metabolizza altri acidi grassi polinsaturi per formare mediatori pro-risoluzione specializzati (SPM) come lipoxine e resolvine, contribuendo alle risposte anti-infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:17114001, PMID:21206090, PMID:31664810
• Può anche partecipare alla migrazione delle cellule dendritiche, alla guarigione delle ferite, all'adesione dei monociti e all'immunità umorale adattiva; interagisce direttamente con CD40 tramite PIK3R1 per produrre ROS nelle cellule B. Riferimenti correlati: PMID:21200133
• Riveste un ruolo nell'omeostasi del glucosio, nella regolazione della secrezione di insulina e nella resistenza all'insulina indotta dall'acido palmitico tramite AMPK, e influenza la mineralizzazione ossea e la differenziazione delle cellule adipose.
• A livello subcellulare, ALOX5 si trova nel citoplasma, nella matrice e membrana nucleare, nella regione perinucleare, nel citosol, nell'involucro nucleare e nello spazio intermembrana.
• È un enzima legante il calcio e il ferro, classificato come dossigenasi e idrolasi, con modifiche di splicing alternativo e fosforilazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-200) di ALOX5 umana; l'anticorpo potrebbe rilevare la forma a lunghezza intera e possibilmente frammenti N-terminali. Convalidare la specificità nel proprio sistema di campionamento.
• La dimensione della banda prevista è di circa 78 kDa nel Western blot; considerare l'uso di marcatori di peso molecolare appropriati e controlli di carico. Ottimizzare i tamponi di lisi e gli inibitori delle proteasi per le frazioni di membrana e nucleari.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), testare i metodi di recupero dell'antigene (tamponi citrato o EDTA) e la titolazione dell'anticorpo. Includere controlli tissutali positivi e negativi rilevanti.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), potrebbe essere necessaria la permeabilizzazione con Triton X-100 per accedere ai pool nucleari e citoplasmatici.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata per saggi quantitativi critici. Considerare il blocco peptidico o il knockdown con siRNA per confermare la specificità.

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