Anticorpo policlonale anti-alpha 1 Spectrin per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P02549

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Spectrin alpha 1

• La catena alpha eritrocitaria della spectrin 1 (SPTA1) è il principale componente della rete citoscheletrica sottostante la membrana plasmatica eritrocitaria.
• Si associa alla banda 4.1 e all'actina per formare la sovrastruttura citoscheletrica della membrana plasmatica eritrocitaria, mantenendo la forma e la stabilità cellulare.
• SPTA1 è localizzata nel citoplasma, nel citoscheletro e nella corteccia cellulare, riflettendo il suo ruolo nelle interazioni tra membrana e citoscheletro.
• La proteina contiene molteplici ripetizioni di spectrin, un dominio SH3 e un motivo EF-hand legante il calcio, fondamentali per le sue funzioni strutturali e di segnalazione.
• Lo splicing alternativo produce molteplici isoforme con funzioni tessuto-specifiche, ampliando la diversità funzionale della spectrin.
• Le mutazioni di SPTA1 sono associate a ellissocitosi ereditaria, piropoichilocitosi e anemia emolitica, sottolineandone la rilevanza clinica.
• Gli studi di fosforilazione e proteomica hanno identificato SPTA1 come un nodo chiave nella biologia eritrocitaria e nella meccanica della membrana.
• Il peso molecolare è di circa 280 kDa, come dedotto dalla sequenza e confermato dall'analisi SDS-PAGE.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 940-1160) copre una regione centrale di ripetizione, che può riconoscere molteplici isoforme di SPTA1; verificare la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 280 kDa; utilizzare gel di poliacrilammide a bassa percentuale (ad esempio 6%) e condizioni di trasferimento umido ottimizzate per proteine ad alto peso molecolare.
• Per l'immunofluorescenza (IF) e l'immunoistochimica (IHC), ottimizzare la fissazione (ad esempio con PFA al 4%) e la permeabilizzazione per preservare il citoscheletro della membrana eritrocitaria; il recupero antigenico può migliorare l'accessibilità dell'epitopo.
• Per l'ELISA, considerare il rivestimento con l'immunogeno ricombinante o con estratti della membrana eritrocitaria e titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• È stata riportata una reattività crociata con SPTA1 di topo e ratto; eseguire una validazione specie-specifica se si utilizzano campioni provenienti da questi organismi.

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