Anticorpo monoclonale di coniglio anti-spettrina alfa 1 per WB e ELISA - P02549

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della spettrina alfa 1

• La proteina codificata dal gene SPTA1 è la catena alfa della spettrina eritrocitaria 1, nota anche come alfa-spettrina eritroide. È un componente strutturale fondamentale del citoscheletro della membrana eritrocitaria.
• La spettrina è il principale componente della rete citoscheletrica sottostante la membrana plasmatica degli eritrociti, dove si associa alla banda 4.1 e all’actina per formare una sovrastruttura che mantiene la forma e l’elasticità cellulare.
• La catena alfa della spettrina contiene molteplici ripetizioni di spettrina, un dominio SH3 e un motivo EF-hand di legame al calcio, contribuendo alla sua capacità di legarsi all’actina e organizzare il citoscheletro corticale.
• A livello subcellulare, la spettrina alfa 1 è localizzata nel citoplasma, nel citoscheletro e nella corteccia cellulare, in linea con il suo ruolo nel sostenere la membrana plasmatica.
• Le mutazioni di SPTA1 sono associate all’ellittocitosi ereditaria e alla piropoichilocitosi, evidenziandone la funzione critica nell’integrità eritrocitaria.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione, che può regolare le interazioni della spettrina e la dinamica del citoscheletro.
• Lo splicing alternativo di SPTA1 produce molteplici isoforme con pattern di espressione specifici dei tessuti.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L’immunogeno è un peptide sintetico corrispondente a una regione interna (amminoacidi 2300–2400), suggerendo che l’anticorpo riconosca un epitopo lineare. Per il Western blot, si consiglia di utilizzare un sistema di gel denaturante e di ottimizzare le condizioni di trasferimento per le proteine ad alto peso molecolare (~280 kDa).
• Considerato il peso molecolare previsto di 280 kDa, un gel di poliacrilammide a bassa percentuale (ad es. 6–8%) e tempi di trasferimento prolungati possono migliorare la rilevazione. Includere marcatori di peso molecolare appropriati per confermare la dimensione della banda.
• La reattività crociata dell’anticorpo con uomo, topo e ratto indica la conservazione della sequenza dell’epitopo. Validare le prestazioni dell’anticorpo in lisati di campioni pertinenti (ad es. eritrociti o linee cellulari di eritroleucemia) per confermarne la specificità.
• Per le applicazioni ELISA, il design dell’immunogeno peptidico supporta formati di saggio diretti o indiretti. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e utilizzare, quando disponibile, spettrina alfa 1 ricombinante o purificata come controllo positivo.

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