Anticorpo monoclonale anti-alfa-2-macroglobulina (A2M) per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01023

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'alfa-2-macroglobulina (A2M)

• L'alfa-2-macroglobulina (A2M) è una grande glicoproteina plasmatica codificata dal gene A2M (noto anche come CPAMD5) e appartiene alla famiglia delle alfa-macroglobuline, che comprende le proteine simili a C3 e PZP.
• L'A2M funziona come inibitore ad ampio spettro delle proteasi, capace di inibire tutte e quattro le classi di proteinasi (seriniche, cisteiniche, aspartiche e metalloproteasi) attraverso un esclusivo meccanismo di “intrappolamento”.
• Il meccanismo di intrappolamento coinvolge una regione esca contenente specifici siti di scissione; in seguito alla scissione proteolitica, un cambiamento conformazionale intrappola la proteasi, impedendo l'accesso ai substrati ad alto peso molecolare, lasciando intatta l'attività verso i substrati piccoli.
• In seguito alla scissione della regione esca, un legame tioestere all'interno dell'A2M viene idrolizzato, determinando il legame covalente della proteina alla proteasi intrappolata, che viene quindi eliminata dalla circolazione.
• L'A2M è secreta e si trova principalmente nel plasma, dove svolge un ruolo fondamentale nella regolazione dell'attività proteolitica nel sangue e nei tessuti.
• La proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali, tra cui la glicosilazione e la formazione di ponti disolfuro e del caratteristico legame tioestere essenziale per la sua funzione di intrappolamento delle proteasi.
• L'A2M presenta inoltre un legame isopeptidico ed è stata identificata come inibitore delle proteasi seriniche; la sua struttura è stata determinata ed è un componente del proteoma di riferimento.
• In quanto glicoproteina secreta con un peso molecolare di circa 163 kDa, l'A2M svolge ruoli fondamentali nell'immunità innata, nell'infiammazione e nel rimodellamento tissutale, controllando la proteolisi eccessiva.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende i residui 1200–1300 nella regione C-terminale; tenere conto della posizione di questo epitopo nella progettazione di saggi di blocco o di competizione.
• Per il Western blot, prevedere una banda a circa 163 kDa; ottimizzare la percentuale del gel e le condizioni di trasferimento per garantire un trasferimento efficiente delle proteine ad alto peso molecolare.
• Questo anticorpo è adatto per ELISA e IHC su sezioni incluse in paraffina; validarlo nel sistema di campioni pertinente utilizzando controlli appropriati.
• È stata riportata una reattività crociata con l'A2M di topo e ratto, ma è necessario verificare l'allineamento delle sequenze qualora siano richiesti confronti quantitativi tra specie.

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