Anticorpo policlonale di coniglio anti-Alpha-2-Macroglobulina (A2M) per WB, ELISA - P01023

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione dell'Alpha-2-Macroglobulina (A2M)

• L'Alpha-2-macroglobulina (A2M) è una glicoproteina plasmatica di grandi dimensioni che agisce come inibitore ad ampio spettro delle proteasi, in grado di intrappolare proteasi di tutte e quattro le classi catalitiche attraverso un meccanismo unico di cambiamento conformazionale.
• La proteina contiene una "regione esca" con siti di scissione specifici; la scissione proteolitica all'interno di questa regione innesca un importante riarrangiamento strutturale che intrappola fisicamente la proteasi invasiva.
• Dopo la scissione della regione esca, un legame tioestere interno viene idrolizzato, consentendo l'attacco covalente dell'A2M alla proteasi. Questo processo intrappola l'enzima mantenendo la sua attività verso substrati di piccole dimensioni, ma limitando l'accesso a quelli di grandi dimensioni.
• Codificata dal gene A2M (ID gene: 2), l'A2M appartiene alla famiglia delle alpha-2-macroglobuline, che include proteine correlate come PZP (proteina della zona gravidica) e la componente complementare C3.
• L'A2M è secreta e si trova principalmente nel plasma, dove svolge un ruolo chiave nella regolazione delle cascate proteolitiche, nella modulazione dell'infiammazione e nel mantenimento dell'omeostasi.
• Le modifiche post-traduzionali includono legami disolfuro, glicosilazione N-linked e il legame tioestere unico che forma un legame isopeptidico durante l'intrappolamento della proteasi.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1155–1474 dell'A2M umano, una regione che può contenere parti della regione esca e del dominio tioestere. I ricercatori dovrebbero considerare di verificare la reattività sia con le forme native sia con quelle denaturate nei propri sistemi di analisi.
• Per il Western blotting (WB), in condizioni riducenti può essere osservata una banda vicino a 163 kDa; si raccomanda la validazione utilizzando controlli positivi e negativi (ad esempio, campioni di plasma di uomo, topo o ratto).
• Per le applicazioni ELISA, è possibile esplorare l'uso di set di anticorpi accoppiati o formati sandwich. Titolare attentamente l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Grazie alla reattività crociata con l'A2M di topo e ratto, questo anticorpo può essere adatto per studi traslazionali; tuttavia, è necessario verificare l'omologia di sequenza specifica della specie per la regione dell'epitopo.

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