Anticorpo monoclonale anti-alfa-fetoproteina (AFP) per WB, ELISA - P02771

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell’alfa-fetoproteina

• L’alfa-fetoproteina (AFP) è una proteina plasmatica secreta che funge da trasportatore per ioni metallici, acidi grassi e bilirubina.
• Si lega a rame e nichel e, in misura minore rispetto all’albumina sierica, alla bilirubina.
• L’AFP viene sintetizzata principalmente dal fegato fetale e dal sacco vitellino, e i suoi livelli plasmatici diminuiscono dopo la nascita.
• Una frazione minore dell’AFP umana (<2%) presenta capacità di legame agli estrogeni.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali, tra cui glicosilazione, fosforilazione e solfatazione.
• Contiene ponti disolfuro e ripetizioni strutturali, che contribuiscono alla sua conformazione secreta stabile.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L’immunogeno corrisponde all’AFP matura a lunghezza completa (residui 19-609), pertanto è probabile che generi anticorpi in grado di riconoscere sia le forme native sia quelle denaturate; tenere conto di questo aspetto nella progettazione del test.
• Per il WB, il peso molecolare previsto è di ~69 kDa; verificare la banda nel lisato del campione specifico, poiché la glicosilazione può causare lievi variazioni delle dimensioni.
• Poiché l’AFP è una proteina secreta, assicurarsi che la preparazione del campione (ad es. siero, surnatante cellulare) sia appropriata per la rilevazione.
• Validare la specificità dell’anticorpo utilizzando controlli positivi appropriati (ad es. lisato di cellule HepG2, siero umano) e controlli negativi.
• Per l’ELISA, l’abbinamento con un anticorpo di cattura può essere ottimizzato; eseguire i test in formato ELISA sandwich utilizzando uno standard di AFP ricombinante.

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