Anticorpo policlonale di coniglio anti-AMACR per WB, IF, IHC, ELISA - Q9UHK6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della racemasi dell'alfa-metilacil-CoA

• La racemasi dell'alfa-metilacil-CoA (AMACR), chiamata anche racemasi del 2-metilacil-CoA, è un enzima con localizzazione duale nei perossisomi e nei mitocondri.
• Catalizza l'interconversione degli stereoisomeri (R)- e (S)- degli esteri degli acil-CoA degli acidi grassi a catena ramificata alfa-metilati, essenziale per la degradazione degli acidi grassi a catena ramificata. I substrati includono il pristanoil-CoA, il triidrossicoprostanoyl-CoA (intermedio nella sintesi degli acidi biliari) e il farmaco ibuprofene. Riferimenti correlati: PMID:7649182, PMID:10655068, PMID:11060359
• AMACR agisce esclusivamente sui tioesteri del coenzima A e non metabolizza gli acidi grassi liberi né gli acil-CoA a catena lineare o a catena ramificata 3-metilata.
• L'enzima è codificato dal gene AMACR, che è soggetto a splicing alternativo e produce molteplici isoforme proteiche.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione, che può regolarne l'attività o la stabilità.
• I difetti di AMACR sono associati alla colestasi intraepatica e ad altre condizioni metaboliche, evidenziandone l'importanza clinica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato era una proteina ricombinante corrispondente agli amminoacidi 1–138 dell'AMACR umano (NP_055139.4). È probabile che questa regione N-terminale generi anticorpi in grado di riconoscere molteplici isoforme.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 42 kDa sulla base del peso molecolare previsto.
• L'immunofluorescenza (IF) e l'immunoistochimica (IHC) possono essere utilizzate per visualizzare la localizzazione dell'AMACR nelle cellule e nei tessuti; si consiglia di includere marcatori degli organelli appropriati per confermare la distribuzione perossisomiale e mitocondriale.
• Data l'elevata conservazione della sequenza tra AMACR umano, murino e di ratto, si prevede che questo anticorpo rilevi la proteina in queste specie; tuttavia, si raccomanda la validazione nella specie e nel tipo di campione pertinenti.
• L'anticorpo può essere adatto per applicazioni ELISA; tuttavia, sono necessarie un'adeguata ottimizzazione del test e l'inclusione di controlli appropriati.

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