Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-AMACR/p504S per WB, ELISA - Q9UHK6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AMACR

• L'alfa-metilacil-CoA racemasi (AMACR), nota anche come 2-metilacil-CoA racemasi, è codificata dal gene AMACR (ID gene: 23600) ed è essenziale per il metabolismo degli acidi grassi a catena ramificata.
• AMACR catalizza la racemizzazione degli esteri di alfa-metil-acil-CoA a catena ramificata, convertendo gli stereoisomeri (R)- e (S)-, un passaggio fondamentale per la beta-ossidazione degli acidi grassi a catena ramificata nei perossisomi. Riferimenti correlati: PMID:10655068 PMID:11060359 PMID:7649182
• L'enzima agisce esclusivamente sui tioesteri del coenzima A e accetta substrati tra cui pristanoil-CoA e triidrossicoprostanoyl-CoA (coinvolti nella sintesi degli acidi biliari), oltre all'acido arilpropionico ibuprofene, ma non agisce su acil-CoA ramificati in posizione 3 o a catena lineare. Riferimenti correlati: PMID:10655068 PMID:11060359 PMID:7649182
• AMACR si localizza sia nei perossisomi sia nei mitocondri, in linea con il suo ruolo nel metabolismo degli acidi grassi organellari.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione e il gene è soggetto a splicing alternativo (parola chiave UniProt: Acetilazione, Splicing alternativo).
• Le varianti genetiche di AMACR sono associate a colestasi intraepatica e altre patologie metaboliche (parola chiave UniProt: Variante patogena, Colestasi intraepatica).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 1-138 dell'AMACR umano) bersaglia la regione N-terminale; considerare il potenziale mascheramento dell'epitopo o la sua assenza in alcune varianti di splicing e validare sempre nel sistema di campioni rilevante.
• Per Western blot, è attesa una banda vicina a 42 kDa; ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le impostazioni di esposizione e confermare la reattività con lisati di tessuto di topo o ratto se sono pianificati studi interspecie.
• Nelle applicazioni ELISA, l'immunogeno ricombinante può essere utilizzato come controllo positivo; valutare le condizioni di rivestimento e rilevazione per l'antigene bersaglio nelle matrici biologiche.
• Data la localizzazione perossisomiale e mitocondriale, la frazionamento subcellulare o l'arricchimento di organelli possono migliorare la sensibilità di rilevazione in campioni complessi.

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