Anticorpo policlonale coniglio Anti-AMBP per WB, ELISA - P02760

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AMBP

• Il gene AMBP codifica una proteina precursore che viene clivata in due catene funzionali: l'alfa-1-microglobulina (proteina HC/A1M) con attività antiossidante e di riparazione tissutale, e la bikunina, un inibitore delle serina proteasi di tipo Kunitz.
• L'alfa-1-microglobulina (A1M) presenta attività reduttasi, di legame all'eme e di captazione dei radicali liberi. Essa riduce la metaemoglobina extracellulare, lega e degrada l'eme libero per prevenire l'emolisi e protegge dal danno ossidativo le particelle di lipoproteine a bassa densità e le strutture della matrice extracellulare. Riferimenti bibliografici: PMID:11877257 PMID:15683711 PMID:22096585 PMID:32092412 PMID:25698971
• All'interno dei mitocondri, A1M si associa al complesso I della catena respiratoria, mantenendo l'omeostasi redox mediante la captazione dei radicali liberi e la riduzione del citocromo c da Fe3+ a Fe2+. Riferimenti bibliografici: PMID:23157686 PMID:32823731
• La bikunina agisce come inibitore delle serina proteasi di tipo Kunitz, inibendo efficacemente la kallicreina, la granzima K, la plasmina, il fattore Xa, la tripsina, la chimasi e la triptasi. Svolge un ruolo nella modulazione dell'infiammazione delle vie aeree e delle risposte citotossiche. Riferimenti bibliografici: PMID:10480954 PMID:15917224 PMID:16873769
• La bikunina è anche un componente strutturale della matrice extracellulare, contribuendo al rimodellamento dello spazio extracellulare e all'adesione cellulare. Fa parte del complesso inibitore dell'inter-alfa-tripsina, facilitando il trasferimento delle catene pesanti sull'ialuronano e inibisce la cristallizzazione dell'ossalato di calcio. Riferimenti bibliografici: PMID:20463016 PMID:25301953 PMID:16873769 PMID:7676539
• AMBP è ampiamente espresso nel fegato e secreta nel plasma, nelle urine e nel liquido cerebrospinale. È rilevabile anche nei globuli rossi, nel tessuto placentare, nei cheratinociti, nel derma e nell'epitelio delle vie aeree. A livello subcellulare, si localizza nello spazio extracellulare, nel reticolo endoplasmatico, nel citoplasma, sulla membrana cellulare, sulla membrana nucleare e sulla membrana mitocondriale interna.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato copre gli amminoacidi 20-202 della proteina AMBP umana, includendo la catena dell'alfa-1-microglobulina (A1M). È previsto che l'anticorpo riconosca A1M e potrebbe anche rilevare il precursore full-length; tenere conto di questo aspetto durante l'interpretazione delle bande in Western blot.
• In WB, la proteina AMBP full-length ha un peso molecolare previsto di ~39 kDa; tuttavia, le catene processate o le forme glicosilate possono comparire con dimensioni differenti. Utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e valutare la differenza tra condizioni riducenti e non riducenti.
• Per applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di rilevazione. Se si desidera un formato ELISA sandwich, l'abbinamento con un anticorpo monoclonale di cattura specifico per un epitopo diverso può migliorare la specificità del test.
• L'anticorpo presenta reazione crociata con l'AMBP del topo, indicando una possibile conservazione dell'epitopo. Si raccomanda la validazione in campioni derivati da topo prima dell'utilizzo in sistemi sperimentali murini.
• A causa della presenza di legami disolfuro nella bikunina, possono essere necessarie condizioni non riducenti per preservare il riconoscimento dell'epitopo se si mira alla catena della bikunina.

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