Anticorpo monoclonale anti-AMPK alfa 1/2 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13131 / P54646

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AMPK alfa 1/2

• La subunità catalitica alfa-1 di AMPK (PRKAA1) agisce come sensore centrale dell'energia, attivando le vie cataboliche e inibendo i processi anabolici durante lo stress energetico cellulare per ripristinare i livelli di ATP. Riferimenti correlati: PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• Nel metabolismo lipidico, AMPK fosforila direttamente e inattiva la carbossilasi dell'acetil-CoA (ACACA/ACACB) e la reduttasi HMG-CoA (HMGCR), sopprimendo così la sintesi degli acidi grassi e del colesterolo.
• AMPK governa la riprogrammazione trascrizionale fosforilando fattori di trascrizione chiave e coattivatori (es. CRTC2, FOXO3, SREBF1, PPARGC1A) e l'istone H2B, modulando l'espressione genica metabolica. Riferimenti correlati: PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Attraverso la fosforilazione di RPTOR e TSC2, AMPK inibisce il complesso mTORC1, portando alla downregulation della crescita e proliferazione cellulare, e promuove l'autofagia in condizioni di privazione di nutrienti. Riferimenti correlati: PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:21205641
• A livello subcellulare, AMPK alfa-1 si localizza prevalentemente nel citoplasma e nel nucleo, ed è rilevata anche sui endosomi tardivi, coerentemente con i suoi diversi ruoli di segnalazione.
• La proteina è soggetta a una fosforilazione estesa su residui multipli di serina/treonina e, in base all'identificazione proteomica, può presentare glicosilazione N-legata.
• AMPK alfa-1 mostra anche attività chinasi della proteina tau e può fosforilare MAPT/TAU in risposta al beta-amiloide, sebbene il significato in vivo rimanga poco chiaro.
• Questo anticorpo riconosce sia la subunità catalitica alfa-1 (codificata da PRKAA1, UniProt Q13131) sia la subunità alfa-2 altamente omologa (codificata da PRKAA2, UniProt P54646), rendendolo uno strumento pan-AMPK-alfa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre i residui 13–300 dell'AMPK alfa-1 umano, comprendendo il dominio chinasi. Questa regione è ben conservata tra umano, topo e ratto, supportando la riportata ampia reattività crociata tra specie.
• Per il Western blotting, ci si aspetta una banda predominante a circa 64 kDa. L'AMPK alfa-1 endogeno è ampiamente espresso; considerare l'uso di lisati da linee cellulari come HeLa, HEK293T, o tessuti come fegato e muscolo scheletrico come controlli positivi.
• In immunofluorescenza e immunochimica, sono previsti segnali sia citoplasmatici che nucleari. La localizzazione subcellulare può spostarsi sotto specifiche condizioni di stress (es. privazione di glucosio, attivatori di AMPK), quindi i protocolli di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzati per il compartimento target.
• Per saggi basati su ELISA, la natura monoclonale di questo anticorpo garantisce coerenza batch-to-batch; tuttavia, gli utenti dovrebbero validare le condizioni ottimali di rivestimento e rilevazione nel loro specifico sistema di saggio.

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