Anticorpo policlonale anti-AMPKα1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13131

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AMPKα1

• AMPKα1, codificato dal gene PRKAA1, è la subunità catalitica alfa-1 della chinasi proteica attivata dall'AMP (AMPK), nota anche come chinasi ACACA, chinasi HMGCR e chinasi della proteina tau PRKAA1.
• Agisce come un sensore centrale dell'energia che viene attivato quando i livelli di ATP intracellulare diminuiscono, attivando le vie cataboliche e spegnendo i processi anabolici per ripristinare l'equilibrio energetico. Riferimenti correlati: PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• Regola il metabolismo lipidico fosforilando direttamente e inibendo la carbossilasi dell'acetil-CoA (ACACA/ACACB) e la reduttasi HMG-CoA (HMGCR), e promuovendo la lipolisi attraverso la fosforilazione della lipasi sensibile agli ormoni e della CHKalpha2. Riferimenti correlati: PMID:34077757
• Controlla l'omeostasi del glucosio stimolando la traslocazione di GLUT4 alla membrana plasmatica e fosforilando i componenti della segnalazione dell'insulina IRS1, PFKFB2 e PFKFB3 (Per similarità).
• Modula la crescita cellulare, la proliferazione e l'autofagia fosforilando TSC2 e RPTOR per inibire la segnalazione mTORC1, e attivando direttamente ULK1 per avviare l'autofagia. Riferimenti correlati: PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:21205641 PMID:28561066
• Influisce sulla trascrizione e sulla struttura della cromatina fosforilando i regolatori della trascrizione come CRTC2, FOXO3, HDAC5 e p53, nonché l'istone H2B in Ser36. Riferimenti correlati: PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nei endosomi tardivi, ed è implicato in processi aggiuntivi tra cui il ritmo circadiano, la segnalazione Wnt e le interazioni ospite-virus, come indicato dalle sue estese annotazioni di parole chiave.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide all'interno del dominio chinasico (aa 381–520), una regione altamente conservata che probabilmente spiega la reattività crociata con umano, topo e ratto.
• Per il Western blot (WB), ci si aspetta una banda a ~64 kDa. Utilizzare lisati di controllo positivo da linee cellulari che esprimono AMPKα1 (es. HeLa, HEK293).
• Per IHC-P e IF/ICC, ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo; notare che può verificarsi sia colorazione nucleare che citoplasmatica, riflettendo la localizzazione di AMPKα1.
• L'anticorpo è adatto anche per ELISA; considerare l'abbinamento con un anticorpo secondario etichettato o l'uso in ELISA a sandwich con una coppia di anticorpi abbinata.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare; includere controlli appropriati e rivalidare quando si cambia lotto.

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