Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-AMPKα1 per WB, ELISA - Q13131

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di AMPKα1

• Sensore energetico centrale: AMPKα1 è la subunità catalitica della proteina chinasi attivata da AMP, un sensore energetico maestro che risponde ai bassi livelli di ATP attivando le vie di produzione di energia e inibendo la biosintesi, mantenendo così l'omeostasi energetica cellulare. Riferimenti correlati: PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• Regolazione del metabolismo lipidico: Fosforila e inattiva enzimi chiave del metabolismo lipidico come ACACA, ACACB e HMGCR, sopprimendo la sintesi di acidi grassi e colesterolo. Inoltre, promuove la lipolisi tramite la fosforilazione di CHKA. Riferimenti correlati: PMID:34077757
• Modulazione trascrizionale e della cromatina: AMPKα1 regola l'espressione genica fosforilando direttamente numerosi fattori di trascrizione e modificatori della cromatina (es. CRTC2, FOXO3, HDAC5, p53, SREBF1/2, PPARGC1A e istona H2B), influenzando la trascrizione metabolica e di risposta allo stress. Riferimenti correlati: PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Controllo di mTORC1 e autofagia: In risposta alla carenza di nutrienti, AMPKα1 inibisce la via mTORC1 fosforilando TSC2 e RPTOR, e fosforila direttamente la subunità WDR24 di GATOR2 per sopprimere l'attivazione di mTORC1 mediata dal glucosio. Contemporaneamente promuove l'autofagia attivando ULK1. Riferimenti correlati: PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:36732624 PMID:21205641
• Localizzazione subcellulare: AMPKα1 risiede nel citoplasma, nel nucleo e negli endosomi tardivi, consentendo le sue diverse funzioni di segnalazione nel rilevamento energetico, nella regolazione trascrizionale e nel traffico vescicolare.
• Modificazioni post-traduzionali e isoforme: Come fosfoproteina e glicoproteina, AMPKα1 è soggetta a multiple modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione e ubiquitinazione. Il gene PRKAA1 genera diverse isoforme tramite splicing alternativo, potenzialmente espandendo la diversità funzionale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 100–200 all'interno del dominio chinasico N-terminale di AMPKα1 umano, una regione altamente conservata tra le specie, coerente con la reattività crociata murina riportata.
• Per il Western blot, è prevista una banda di circa 64 kDa. Validare utilizzando controlli positivi (es. linee cellulari che esprimono AMPKα1) e negativi per confermare la specificità.
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale fornisce il riconoscimento di più epitopi. Considerare l'accoppiamento con un anticorpo di cattura monoclonale per configurazioni ELISA sandwich.
• Poiché l'attività di AMPKα1 è sensibile allo stato energetico cellulare, condizioni sperimentali che elevano l'AMP (es. trattamento con AICAR o deprivazione di glucosio) possono influenzare il rilevamento.
• Includere sempre controlli appropriati e ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo per ogni sistema di saggio.

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