Anticorpo policlonale di coniglio anti-AMPKa1/AMPKa2 per WB, IHC-P, ELISA - Q13131 / P54646

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di AMPKa1/AMPKa2

• AMPK (proteina chinasi attivata dall'AMP) è un sensore energetico eterotrimerico composto da una subunità α catalitica (PRKAA1/α1 o PRKAA2/α2), una subunità β regolatoria e una subunità γ. La subunità α1 è una chinasi serina/treonina da 64 kDa, fondamentale per l'omeostasi energetica cellulare.
• In risposta a bassi livelli di ATP, AMPK attiva le vie cataboliche e inibisce i processi anabolici, come la biosintesi di proteine, carboidrati e lipidi, nonché la crescita e la proliferazione cellulare.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• AMPK fosforila direttamente i regolatori della trascrizione (ad es. CRTC2, FOXO3, istone H2B, HDAC5, p53) per modulare l'espressione genica e la struttura della cromatina in risposta allo stress metabolico.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Regola negativamente la segnalazione di mTORC1 fosforilando TSC2, RPTOR, WDR24 e FNIP1, inibendo così la crescita cellulare e promuovendo l'autofagia in condizioni di carenza di nutrienti.
  Riferimenti correlati:
  PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:36732624, PMID:37079666
• AMPK promuove l'autofagia fosforilando e attivando direttamente ULK1 e WDR45.
  Riferimenti correlati:
  PMID:21205641, PMID:28561066
• AMPK è localizzata nel citoplasma e nel nucleo e può associarsi agli endosomi tardivi, in linea con il suo ruolo nella segnalazione metabolica e nel traffico intracellulare.
• Le principali caratteristiche post-traduzionali includono la fosforilazione, che ne regola l'attività, il legame ai nucleotidi (AMP/ATP) e la glicosilazione. L'enzima è coinvolto in numerose vie, tra cui il metabolismo dei lipidi e degli steroli, l'autofagia, il ritmo circadiano e la segnalazione Wnt.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 13-300) comprende una regione altamente conservata di PRKAA1/PRKAA2, spiegando la robusta reattività crociata con campioni umani, murini e di ratto.
• Per il Western blot, le isoforme endogene di AMPKα vengono rilevate come bande intorno a 62-65 kDa; la presenza di più bande può riflettere splicing differenziale o diversi stati di fosforilazione.
• L'IHC-P può richiedere il recupero antigenico (ad es. tampone citrato a pH 6,0) e un'attenta titolazione; si raccomanda l'inclusione di appropriati controlli tissutali positivi e negativi.
• Le applicazioni ELISA possono essere sviluppate utilizzando proteine ricombinanti o standard peptidici; abbinare anticorpi secondari appropriati e ottimizzare le condizioni di rivestimento.

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