Anticorpo policlonale Anti-AMT per WB, IF/ICC, ELISA - P48728

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'AMT

• AMT codifica l'aminometiltransferasi, la proteina T del sistema mitocondriale di scissione della glicina (GCS), anche indicato come complesso glicina decarbossilasi.
• Il GCS catalizza la decarbossilazione ossidativa della glicina in anidride carbonica, ammoniaca e un'unità a un carbonio, collegando il catabolismo della glicina al metabolismo a un carbonio mediato dal folato e alla biosintesi dei nucleotidi.
• AMT è un enzima dipendente dal piridossal fosfato (PLP) che trasferisce il gruppo metilammina dall'intermedio proteina H al tetraidrofolato, formando 5,10-metilentetraidrofolato e ammoniaca.
• Localizzato nella matrice mitocondriale, AMT supporta la via primaria di degradazione della glicina e fornisce unità a un carbonio per i processi citosolici.
• Lo splicing alternativo produce multiple varianti di trascrizione; le varianti patogeniche di AMT sono associate a iperglicinemia non chetosica (encefalopatia da glicina), un grave disordine neurometabolico autosomico recessivo.
• La proteina presenta un peptide di transito mitocondriale ed è annotata con parole chiave tra cui aminotransferasi, variante di malattia e proteoma di riferimento.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• La regione immunogenica (residui 107–386) rientra nella proteina matura, potenzialmente permettendo il rilevamento di multiple isoforme; validare i pattern di banda utilizzando lisati arricchiti di mitocondri o lisati cellulari totali da fegato o rene, dove AMT è espressa abbondantemente.
• Per il western blot, ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario in base all'abbondanza del bersaglio e alla sensibilità di rilevazione nel proprio sistema di campionamento; includere un controllo positivo noto (es. mitocondri di fegato umano HepG2 o murino).
• Nell'immunofluorescenza, considerare una colorazione combinata con un marcatore mitocondriale (es. Tom20 o MitoTracker) per confermare la prevista localizzazione mitocondriale.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'uso di AMT ricombinante come standard per stabilire un saggio quantitativo robusto; verificare la linearità e il recupero nella matrice biologica pertinente.

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