Anticorpo policlonale di coniglio anti-AMY2A per WB, IF-P, ELISA - P04746

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AMY2A

• AMY2A codifica per l'alfa-amilasi pancreatica, una glicosidasi secreta nota anche come 1,4-alfa-D-glucano glucanoidrolasi.
• L'enzima viene secreto nello spazio extracellulare, coerentemente con il suo ruolo digestivo nella scomposizione dei carboidrati.
• L'espressione di AMY2A è rilevata specificamente nel pancreas a livello proteico.
• Appartiene alla famiglia 13 delle glicosil idrolasi e la sua attività richiede ioni calcio e cloruro, come indicato dalle parole chiave relative al legame con i metalli e agli ioni.
• Lo splicing alternativo del gene AMY2A produce molteplici varianti di trascritto, che potenzialmente danno origine a isoforme con proprietà distinte.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked e la formazione di un residuo di acido pirrolidon carbossilico all'N-terminale.
• La struttura tridimensionale di AMY2A è stata risolta, fornendo approfondimenti sul suo meccanismo catalitico.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 16–511 dell'AMY2A umana, quasi l'intera sequenza matura. Questa ampia copertura suggerisce che l'anticorpo policlonale possa riconoscere molteplici epitopi lineari e conformazionali.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di ~58 kDa. Utilizzare lisato di tessuto pancreatico preparato di fresco come controllo positivo e considerare condizioni riducenti e non riducenti per valutare gli epitopi conformazionali.
• Nell'immunofluorescenza su sezioni incluse in paraffina (IF-P), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e convalidare la specificità della colorazione utilizzando controlli tissutali appropriati.
• L'anticorpo presenta cross-reattività con gli ortologhi AMY2A di topo e ratto secondo il fornitore; verificare la reattività nel proprio modello sperimentale specifico confrontando controlli positivi e negativi della stessa specie.
• Per l'ELISA, la natura policlonale può offrire un'elevata sensibilità; tuttavia, a causa della potenziale variabilità tra lotti, includere uno standard di riferimento interno quando si confrontano i dati tra esperimenti.

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