Anticorpo policlonale anti-ANAPC11 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NYG5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ANAPC11/APC11

• ANAPC11, noto anche come subunità 11 del complesso promotore dell'anafase, subunità 11 del ciclosoma o proteina con dito RING associata al carcinoma epatocellulare, è codificato dal gene ANAPC11 e produce una proteina di 10 kDa (Q9NYG5).
• È un componente fondamentale del complesso promotore dell'anafase/ciclosoma (APC/C), una ligasi E3 dell'ubiquitina regolata dal ciclo cellulare, che controlla la progressione del ciclo cellulare mediando l'ubiquitinazione e la degradazione delle proteine bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:11739784, PMID:18485873, PMID:27120157
• Insieme ad ANAPC2, ANAPC11 forma il componente catalitico della ligasi E3, catalizzando principalmente la formazione di catene di poliubiquitina legate tramite 'Lys-11' e, in misura minore, di catene legate tramite 'Lys-48' e 'Lys-63'. Riferimenti correlati: PMID:11739784, PMID:18485873, PMID:29033132
• APC/C viene attivato da CDC20 durante la transizione metafase/anafase, indirizzando proteine fondamentali come la ciclina B e la securina verso la degradazione; l'attività viene inibita dal complesso del checkpoint mitotico (MCC) per ritardare la segregazione cromosomica. Riferimenti correlati: PMID:27120157, PMID:27509861
• La proteina contiene un dominio a dito RING e lega ioni di zinco, caratteristiche tipiche della sua attività di ligasi E3 dell'ubiquitina.
• ANAPC11 è localizzato sia nel citoplasma sia nel nucleo, in linea con il suo ruolo nella regolazione del ciclo cellulare.
• È altamente espresso nel muscolo scheletrico e nel cuore, con livelli moderati nel cervello, nei reni e nel fegato, e livelli bassi nel colon, nel timo, nella milza, nell'intestino tenue, nella placenta, nei polmoni e nei leucociti del sangue periferico.
• Per ANAPC11 è stato osservato uno splicing alternativo, che potrebbe generare molteplici isoforme.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1-84) di ANAPC11 umano, che comprende il dominio a dito RING; questo design può preservare l'accessibilità dell'epitopo per il rilevamento della proteina endogena.
• Per il Western blotting, si prevede una banda di circa 10 kDa; si raccomanda l'uso di condizioni di trasferimento ottimizzate per proteine a basso peso molecolare, al fine di evitare la perdita delle proteine di piccole dimensioni.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC) e nell'immunoistochimica (IHC-P), verificare la specificità dell'anticorpo nei tipi di tessuto pertinenti (ad esempio muscolo scheletrico o cuore, dove l'espressione è elevata) e includere controlli appropriati.
• L'anticorpo è stato validato in ELISA e può essere preso in considerazione per il rilevamento quantitativo in lisati cellulari o in applicazioni con proteine ricombinanti purificate.
• È riportata reattività crociata per uomo e topo; per altre specie, l'analisi dell'omologia di sequenza della regione immunogena può aiutare a prevedere la reattività, ma si raccomanda la validazione sperimentale.

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