Anticorpo policlonale coniglio anti-ANGPT1 per WB, IHC-P, ELISA - Q15389

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Angiopoietin-1

• L'Angiopoietin-1 (ANGPT1) è una glicoproteina secreta che funge da ligando per il recettore tirosin chinasi TEK/TIE2, svolgendo un ruolo centrale nello sviluppo e nella manutenzione vascolare.
• Al legame, l'ANGPT1 induce la dimerizzazione del TEK e la fosforilazione della tirosina, attivando cascate di segnalazione a valle che regolano la sopravvivenza, la proliferazione, la migrazione, l'adesione delle cellule endoteliali e la riorganizzazione del citoscheletro di actina.
• Durante l'embriogenesi, l'ANGPT1 è essenziale per l'angiogenesi normale e lo sviluppo cardiaco, agendo in modo tardivo e distinto rispetto alle vie mediate dal VEGF.
• Nelle cellule endoteliali quiescenti e confluenti, gli oligomeri di ANGPT1 reclutano il TEK alle giunzioni cellula-cellula, attivando preferenzialmente la via PI3K-AKT per promuovere la stabilità vascolare e inibire l'angiogenesi.
• Nelle cellule endoteliali migranti prive di contatti cellula-cellula, l'ANGPT1 ancora il TEK alla matrice extracellulare, stimolando la chinasi delle adesioni focali (FAK) e la segnalazione MAPK/ERK per guidare l'angiogenesi sprouting.
• L'ANGPT1 media la maturazione e la stabilizzazione dei vasi sanguigni ed è implicata nelle interazioni reciproche tra l'endotelio e il mesenchima circostante.
• La proteina subisce splicing alternativo e l'isoforma canonica contiene un peptide segnale, domini a elica alfa (coiled-coil) e un dominio C-terminale simile al fibrinogeno; è soggetta alla formazione di legami disolfuro e alla glicosilazione.
• L'ANGPT1 è associata a varianti della malattia (es. HAE5) ed è un membro del proteoma di riferimento; viene secreta nello spazio extracellulare.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 277–498 dell'ANGPT1 umano, che copre il dominio simile al fibrinogeno. Questa regione è conservata nel topo e nel ratto, coerente con la reattività crociata riportata per l'anticorpo. Per il Western blotting, prevedere una banda vicino a 58 kDa in condizioni riducenti; i lisati da tessuti ricchi di endotelio (es. polmone, placenta) possono servire come controlli positivi.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), il recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore in tampone citrato) può migliorare la colorazione. L'espressione endogena di ANGPT1 è spesso bassa; considerare l'amplificazione del segnale con sistemi di rilevazione sensibili.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale validato può migliorare la specificità. Validare le condizioni del saggio nella matrice di campione pertinente.
• L'anticorpo riconosce sia l'ANGPT1 endogeno che quello ricombinante. Quando si utilizza la proteina ricombinante come standard, assicurarsi che copra la sequenza immunogenica per verificare la reattività dell'anticorpo.

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