Anticorpo monoclonale di coniglio anti-AP1G1 per WB, IHC-P, ELISA - O43747

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di AP1G1

• Codificata dal gene AP1G1 (alias ADTG, CLAPG1), la subunità gamma-1 del complesso AP-1 (nota anche come gamma-adaptina) è una catena pesante del complesso proteico adattatore eterotetramerico 1 (AP-1). Appartiene alla famiglia delle adaptine delle proteine associate alla clatrina.
• Come subunità centrale del complesso AP-1, AP1G1 media il sorting proteico nel Golgi tardivo/rete trans-Golgi (TGN) e negli endosomi. Facilita il reclutamento della clatrina sulle membrane e riconosce i segnali di sorting sulle proteine cargo transmembrana. Nello specifico, in associazione con AFTPH/aftifilina, regola il traffico di transferrina, furina e catepsina D tra il TGN e gli endosomi.
  Riferimenti correlati:
  PMID:15758025
• AP1G1 si localizza nell'apparato di Golgi, nelle vescicole rivestite di clatrina e nella regione perinucleare del citoplasma, coerentemente con la sua funzione nei percorsi di traffico di membrana.
• La proteina fa parte del complesso AP-1, che è composto da due catene pesanti (gamma e beta1), una catena media (mu1) e una catena piccola (sigma1). Lo splicing alternativo del gene AP1G1 genera molteplici isoforme che possono diversificare il suo repertorio funzionale e di localizzazione.
• AP1G1 è ampiamente espresso nei tessuti, sottolineando il suo ruolo fondamentale nella dinamica delle membrane cellulari.
• Le mutazioni in AP1G1 sono collegate alla USRISD, una sindrome autosomica recessiva caratterizzata da disabilità intellettiva, spasticità, bassa statura e anomalie scheletriche, evidenziando l'importanza della proteina nello sviluppo neurologico e in altri processi.
• Le caratteristiche annotate chiave includono la determinazione della struttura 3D, lo splicing alternativo, la formazione di fossette rivestite, il coinvolgimento delle vescicole citoplasmatiche e un'associazione patologica con la disabilità intellettiva.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 723–822 dell'AP1G1 umano. Questa regione è probabilmente specifica per la subunità gamma-1, riducendo al minimo la reattività crociata con altre proteine del complesso adattatore. Per i ricercatori che generano anticorpi personalizzati, si possono considerare strategie di progettazione peptidica simili.
• Questo anticorpo monoclonale di coniglio è validato per Western blot (WB), immunoistochimica (paraffina, IHC-P) ed ELISA. Per il WB, la proteina target migra a circa 91 kDa; si raccomanda di utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e di validare contro lisati di controllo positivi e negativi noti.
• Per l'IHC-P su tessuti inclusi in paraffina e fissati in formalina, considerare l'ottimizzazione dei metodi di recupero dell'antigene (ad es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) e la titolazione dell'anticorpo per ottenere una colorazione specifica con basso background. Grazie alla reattività crociata con topo e ratto, questo anticorpo può essere adatto per l'analisi di AP1G1 in modelli roditori.
• Come per tutti gli anticorpi, consigliamo esperimenti di titolazione iniziale per determinare le diluizioni di lavoro ottimali nelle proprie condizioni di saggio specifiche.

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