Anticorpo monoclonale di coniglio anti-AP2A1 per WB, IF/ICC, ELISA - O95782

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di AP2A1

• AP2A1 codifica la subunità alfa-1 del complesso proteico adattatore AP-2, un componente chiave dell'endocitosi mediata dalla clatrina che collega la selezione del carico alla formazione delle vescicole a livello della membrana plasmatica.
• Il complesso AP-2 si lega direttamente alla clatrina e ai fosfoinositidi di membrana, agendo come principale adattatore della clatrina per promuovere l'assemblaggio di vescicole rivestite di clatrina (CCV) durante l'endocitosi mediata dai recettori.
• AP2A1 riconosce i segnali di smistamento, inclusi i motivi YXXΦ e [ED]XXXL[LI], all'interno delle code citoplasmatiche delle proteine transmembrana del carico, consentendo il reclutamento selettivo del carico nelle vescicole nascenti.
• Durante il potenziamento a lungo termine nei neuroni ippocampali, AP-2 media l'endocitosi di ADAM10, un processo fondamentale per la plasticità sinaptica e la formazione della memoria. Riferimenti correlati: PMID:23676497
• La subunità alfa di AP2A1 funge da piattaforma di impalcatura attraverso il proprio dominio appendicolare C-terminale, reclutando proteine accessorie essenziali per la regolazione dell'endocitosi e lo smistamento del carico.
• A livello subcellulare, AP2A1 si localizza sulla membrana cellulare e nelle fossette rivestite di clatrina, in accordo con il suo ruolo nell'avvio della formazione delle vescicole endocitiche.
• AP2A1 viene espressa sotto forma di molteplici isoforme generate tramite splicing alternativo; l'isoforma A è arricchita nel prosencefalo, nel muscolo scheletrico e nel cuore, mentre l'isoforma B mostra un'ampia distribuzione tissutale ed è presente nei tumori della mammella e della prostata.
• La proteina è soggetta a fosforilazione, che può regolarne l'attività o le interazioni nelle vie di traffico intracellulare.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Durante l'esecuzione del Western blot, è prevista una banda intorno a 108 kDa; si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali provenienti da linee cellulari umane, murine o di ratto come controlli positivi.
• Per l'immunofluorescenza, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per rilevare AP2A1 sulla membrana plasmatica e nelle fossette rivestite; la co-colorazione con la clatrina può confermare la localizzazione.
• L'anticorpo può essere utilizzato per ELISA; convalidare empiricamente il tampone di rivestimento, la concentrazione dell'antigene e il sistema di rilevamento per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale.

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