Anticorpo monoclonale coniglio Anti-AP2S1 per WB e ELISA - P53680

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AP2S1

• AP2S1 codifica per la subunità sigma del complesso proteico adattatore 2 (AP-2), un complesso eterotetramerico essenziale per l'endocitosi mediata dalla clatrina sulla membrana plasmatica. È anche noto come AP17, CLAPS2, sigma2-adaptina e proteina associata al rivestimento di clatrina AP17.
• Come componente centrale di AP-2, la subunità sigma contribuisce al reclutamento selettivo del carico transmembrana nelle vesciche rivestite di clatrina (CCV), riconoscendo i segnali di endocitosi Y-X-X-Φ e [ED]-X-X-X-L-[LI] presenti nelle code citosoliche delle proteine di carico.
• AP-2 funziona come il principale adattatore della clatrina, collegando la rete di clatrina e i componenti della membrana per promuovere la formazione di vescicole e l'ordinamento del carico. È inoltre implicato nel riciclo delle membrane delle vescicole sinaptiche dalla superficie presinaptica.
• Tra le quattro subunità (α, β2, μ2, σ2), la subunità sigma svolge un ruolo nella stabilizzazione del complesso e partecipa al riconoscimento dei motivi di ordinamento basati su di-leucina.
• Subcelularmente, AP2S1 si localizza sulla membrana cellulare e nelle fosse rivestite, in linea con il suo ruolo nelle prime fasi dei processi endocitici.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (come indicato dalla parola chiave UniProt), e lo splicing alternativo produce diverse isoforme.
• AP2S1 può contribuire inoltre all'omeostasi del calcio extracellulare, anche se questa funzione è meno caratterizzata.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo è un peptide sintetico corrispondente alla regione N-terminale (amminoacidi 1-100) di AP2S1 umano. Questa regione è probabilmente esposta sulla superficie e può garantire una buona accessibilità all'epitopo. Se necessario, si consiglia di eseguire esperimenti di blocco con peptide per confermare la specificità.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 17 kDa. Assicurarsi di utilizzare una percentuale di gel adeguata (es. 12-15%) e condizioni di trasferimento appropriate per proteine a basso peso molecolare. Validare l'anticorpo nella vostra matrice di campione specifica, poiché modifiche post-traduzionali o varianti isoformiche possono influenzare il pattern delle bande.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con il topo, quindi è adatto per studi su modelli murini o linee cellulari di topo. Per ELISA, si consiglia di utilizzare un formato diretto o indiretto con un rivestimento antigenico appropriato. La titolazione e l'ottimizzazione sono raccomandate per ogni saggi.
• Dato il ruolo di AP-2 nell'endocitosi, questo anticorpo può essere utile per studiare il traffico di carichi, l'internalizzazione dei recettori e le dinamiche delle vescicole sinaptiche. Combinarlo con marcatori di organelli o saggi funzionali per contestualizzare la localizzazione e l'attività.

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