Anticorpo policlonale anti-APC per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P25054

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di APC

• APC (Proteina adenomatosa polyposis coli) è un soppressore tumorale di 312 kDa che agisce come regolatore negativo della via di segnalazione Wnt promuovendo la rapida degradazione di CTNNB1 (β-catenina).
• Svolge un ruolo nella migrazione cellulare: viene attivato dal fattore di crescita degli epatociti (HGF) ed è necessario per la sovraregolazione di MMP9 tramite la via di segnalazione JNK nelle cellule tumorali del colon-retto.
• APC si associa sia ai microtubuli che ai filamenti di actina, mediando l'organizzazione dell'actina F in fasci ordinati e stabilizzando i microtubuli, in particolare alla corteccia cellulare, attraverso interazioni con ERBB2, le Rho GTPasi e DIAPH1. Riferimenti correlati: PMID:17293347
• La proteina si localizza alle giunzioni aderenti, nel citoplasma, nel citoscheletro, nelle lamellipodie, sulle membrane a piega e sulla membrana cellulare, riflettendo i suoi ruoli dinamici nell'adesione e nella motilità cellulare.
• Esistono più isoforme alternative; l'isoforma 1A è espressa in modo molto forte nel cervello, mentre l'isoforma 1B è la forma predominante nella maggior parte degli altri tessuti, inclusi il tratto gastrointestinale e il sangue.
• APC contiene diversi domini e motivi funzionali, tra cui regioni a coil-coil, ripetizioni armadillo e siti di legame per la β-catenina, ed è soggetto a fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, processi che modulano la sua attività di soppressore tumorale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 2600–2760 dell'APC umano, localizzata nella regione C-terminale. Questo progetto può favorire il riconoscimento di più isoforme e specie.
• Per il western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 312 kDa; si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale (es. 6–8%) e tempi di trasferimento prolungati per una risoluzione ottimale.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), la specificità del segnale deve essere confermata utilizzando appropriati controlli positivi e negativi di tessuti o cellule che esprimono APC.
• L'ELISA può essere utilizzato per la rilevazione; le condizioni ottimali di diluizione dell'anticorpo e di blocco devono essere determinate empiricamente per ogni formato di saggio.
• È riportata la reattività crociata con APC di origine umana, murina e di ratto; quando si lavora con altre specie, convalidare la reattività nel sistema di campioni corrispondente.

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