Anticorpo monoclonale coniglio anti-APC per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P25054

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'APC

• APC è una proteina soppressore tumorale codificata dal gene APC, nota anche come deleted in polyposis 2.5 (DP2.5). Agisce come un importante regolatore negativo della via di segnalazione Wnt promuovendo la rapida degradazione della beta-catenina (CTNNB1).
• APC si associa sia ai microtubuli che ai filamenti di actina, mediando l'organizzazione della F-actina in fasci ordinati. Funziona anche a valle delle GTPasi Rho e DIAPH1 per stabilizzare selettivamente i microtubuli. Riferimenti correlati: PMID:17293347
• La proteina è necessaria per la localizzazione di MACF1 alla membrana cellulare, che è critica per la stabilizzazione dei microtubuli alla corteccia cellulare.
• APC svolge un ruolo nella migrazione cellulare indotta dal fattore di crescita degli epatociti (HGF) ed è necessaria per l'aumento dell'espressione di MMP9 tramite la via di segnalazione JNK nelle cellule tumorali del colon-retto.
• APC è localizzata alle giunzioni cellulari (giunzioni aderenti), nel citoplasma, nel citoscheletro, nelle proiezioni cellulari (lamellipodia e membrane a ruffle) e nella membrana cellulare.
• APC è espressa in una varietà di tessuti tra cui cervello, intestino tenue, colon, timo, muscolo scheletrico, cuore, prostata, polmone, milza, ovaio, testicolo, rene, placenta, sangue e fegato. L'isoforma 1A è fortemente espressa nel cervello, mentre l'isoforma 1B predomina in altri tessuti.
• La proteina subisce fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione e la sua attività è correlata al suo stato di fosforilazione. Contiene domini a spira-elica (coiled-coil) e ripetizioni ARM.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 2600-2760 dell'APC umana (proteina di fusione ricombinante). Per il Western blot, è prevista una banda a circa 312 kDa; considerare l'uso di un gel a bassa percentuale per proteine grandi e condizioni di trasferimento appropriate.
• Nell'immunofluorescenza (IF), prevedere una colorazione alle giunzioni aderenti, alle lamellipodia e alle strutture del citoscheletro, coerente con la localizzazione subcellulare riportata. Convalidare nelle linee cellulari pertinenti.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), testare su sezioni tissutali con nota espressione di APC, come il colon o il cervello, con appropriato recupero dell'antigene.
• Nell'ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevamento; titolare per prestazioni ottimali nel sistema di saggio.

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