Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-APEX1/APE1 (Convalidato KO) per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P27695

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di APEX1/APE1

• APEX1, nota anche come APE1, REF1, HAP1, APEX nucleasi (APEN), è una proteina multifunzionale con due attività principali: riparazione del DNA e regolazione redox dei fattori trascrizionali, svolgendo un ruolo centrale nella risposta cellulare allo stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:11118054 PMID:11452037 PMID:15831793
• Come apurinica/apirimidica (AP) endodeossiribonucleasi, APEX1 avvia la via di riparazione per escissione di basi (BER) catalizzando l'incisione idrolitica dello scheletro del DNA nei siti AP, e possiede anche attività esodeossiribonucleasica 3'-5' e fosfodiesterasica del DNA 3' per processare le estremità del DNA bloccate. Riferimenti correlati: PMID:15380100 PMID:16617147 PMID:18439621 PMID:11832948 PMID:1719477 PMID:15831793 PMID:7516064
• Attraverso la sua funzione redox, APEX1 regola il legame al DNA e l'attività trascrizionale di fattori di trascrizione, incluso il complesso AP-1 FOS/JUN, controllando lo stato redox dei loro domini di legame al DNA. Riferimenti correlati: PMID:10023679 PMID:11118054 PMID:11452037
• APEX1 si localizza in molteplici compartimenti subcellulari, incluso il nucleo (nucleolo e speckles nucleari), citoplasma, mitocondri e reticolo endoplasmatico, riflettendo le sue diverse funzioni.
• APEX1 partecipa alla ricombinazione di scambio di classe dell'isotipo delle immunoglobuline processando i siti AP generati da AICDA e UNG, creando rotture sfalsate che si risolvono in rotture a doppio filamento tramite giunzione non omologa delle estremità.
• Funziona anche come endoribonucleasi, controllando il metabolismo dell'RNA a filamento singolo mediando il turnover dell'mRNA di MYC e partecipando al controllo di qualità dell'rRNA durante la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:19188445 PMID:19401441 PMID:21762700
• Modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione, S-nitrosilazione e ubiquitinazione modulano le attività enzimatiche e di segnalazione di APEX1.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Per il Western blot, è attesa una banda di circa 36 kDa; i dati di convalida KO supportano la specificità per il bersaglio, ma gli utenti dovrebbero confermare le prestazioni nel proprio sistema sperimentale.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, APEX1 mostra una localizzazione nucleare predominante con possibile colorazione citoplasmatica/mitocondriale; ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per preservare l'accessibilità dell'epitopo.
• L'anticorpo è stato segnalato per l'uso in immunoprecipitazione ed ELISA; per queste applicazioni si raccomanda l'ottimizzazione individuale della diluizione dell'anticorpo e delle condizioni di incubazione.
• Data la natura policlonale e l'immunizzazione con proteina ricombinante a lunghezza intera (aa 1-318), l'anticorpo contiene probabilmente specificità per epitopi multipli, potenzialmente fornendo un rilevamento robusto in vari formati di saggio e in presenza di diverse modificazioni post-traduzionali.

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