Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-APOB per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04114

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ApoB

• L'Apolipoproteina B (ApoB) esiste in due isoforme principali: ApoB-48, sintetizzata nell'intestino e incorporata nei chilomicroni, e ApoB-100, prodotta nel fegato e presente nelle particelle VLDL e LDL.
• L'mRNA di ApoB subisce un editing dell'RNA tessuto-specifico, che introduce un codone di stop prematuro per generare l'isoforma troncata ApoB-48 nell'intestino.
• ApoB-100 funge da ligando per il recettore delle LDL (recettore apoB/E), mediando il legame cellulare e l'internalizzazione delle particelle LDL.
• ApoB è un attore centrale nel metabolismo e trasporto lipidico, coinvolto nell'omeostasi del colesterolo e nell'assemblaggio delle lipoproteine.
• Subcellularmente, ApoB si trova nel citoplasma, viene secreta nel plasma e si associa alle goccioline lipidiche.
• La proteina subisce multiple modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, glicosilazione, formazione di legami disolfuro e palmitoilazione.
• Le mutazioni in APOB sono associate a ipercolesterolemia familiare, aterosclerosi e altri disturbi lipidici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1890–2190 dell'ApoB-100 umano (NP_000375.3); questa regione è assente nell'isoforma più corta ApoB-48, rendendo l'anticorpo specifico per ApoB-100 salvo indicazione contraria.
• A causa del suo elevato peso molecolare (~516 kDa), utilizzare gel SDS‑PAGE a bassa percentuale (es. 6–8%), tempi di trasferimento prolungati e un marcatore ad alto peso molecolare per il Western blot.
• Considerare di validare l'anticorpo nel sistema di campioni rilevante (es. lisati epatici per ApoB-100, lisati intestinali per ApoB‑48) per confermare il rilevamento dell'isoforma.
• Per IHC‑P e IF/ICC, ottimizzare i protocolli di recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) e le condizioni di fissativo per i tipi di tessuto specifici.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; si consiglia un'ottimizzazione empirica del tampone di rivestimento, del blocco e delle condizioni di rilevamento.

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