Anticorpo policlonale coniglio anti-APOBEC3G per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9HC16

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di APOBEC3G

• APOBEC3G (A3G/ARCD/ARP-9/CEM15) è una citidina deaminasi che inibisce la replicazione dei retrovirus e la mobilità dei retrotrasposoni attraverso meccanismi dipendenti e indipendenti dalla deaminasi. Riferimenti correlati: PMID:12808465, PMID:16527742, PMID:17121840

• Esibisce una potente attività antivirale contro l'HIV-1 carente di Vif, agendo dopo la penetrazione del nucleocapside virale deaminando la citosina in uracile nel DNA virale a filamento negativo, risultando in ipermutazioni G‑to‑A che compromettono il genoma provirale. Riferimenti correlati: PMID:12167863, PMID:12859895, PMID:14557625, PMID:12808465, PMID:12808466, PMID:12809610

• APOBEC3G seleziona miratamente il DNA a filamento singolo e non deamina il DNA a doppio filamento o l'RNA. Riferimenti correlati: PMID:12808465, PMID:12809610, PMID:12970355

• Oltre all'HIV-1, limita un'ampia gamma di virus inclusi SIV, HBV, EIAV, XMRV e SFV. Riferimenti correlati: PMID:15031497, PMID:16378963, PMID:18448976

• APOBEC3G si localizza prevalentemente nel citoplasma e nei corpi P (P-bodies), ma può essere trovata anche nel nucleo; la sua ritenzione citoplasmatica è collegata alla sua funzione antivirale.

• L'espressione tissutale è osservata nella milza, nei testicoli, nell'ovaio, nei leucociti del sangue periferico e nei linfociti CD4+, ed è fortemente modulata dallo stato di attivazione/differenziazione delle cellule bersaglio, il che correla con la suscettibilità all'HIV-1.

• La proteina contiene due domini deaminasi di coordinamento dello zinco, subisce fosforilazione, ubiquitinazione e altre modificazioni post-traduzionali che regolano la sua attività e stabilità.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 244–257) rientra in una regione conservata dell'APOBEC3G umana, il che potrebbe spiegare la reattività crociata riportata con gli ortologhi di topo e ratto.
• Per il western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di circa 46 kDa; tuttavia, modificazioni post-traduzionali o fattori specifici del campione possono portare alla comparsa di bande aggiuntive. Validare la specificità dell'anticorpo con lisati di controllo positivi e negativi appropriati.
• Per IHC-P e IF/ICC, ottimizzare i metodi di recupero dell'antigene e le diluizioni dell'anticorpo per il tessuto o il tipo cellulare specifico. Considerare l'uso di linee cellulari permissive all'HIV-1 rispetto a quelle non permissive come controlli per confermare la rilevanza funzionale.
• Nelle applicazioni ELISA, il rilevamento abbinato con un anticorpo di cattura può migliorare la sensibilità del saggio; titolare l'anticorpo per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.

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