Anticorpo policlonale coniglio Anti-ApoER2/LRP8 per WB, IF, IHC, ELISA - Q14114

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ApoER2/LRP8

• La proteina 8 correlata al recettore delle lipoproteine a bassa densità (LRP8), nota anche come recettore 2 dell'apolipoproteina E (ApoER2), è codificata dal gene LRP8 e subisce splicing alternativo per generare multiple isoforme.
• LRP8 è un recettore di superficie cellulare per la Reelina (RELN) e per i ligandi contenenti apolipoproteina E, trasmettendo segnali legando DAB1 per regolare la funzione dei microtubuli neuronali e la formazione degli strati durante lo sviluppo del cervello. Riferimenti correlati: PMID:12899622, PMID:12950167, PMID:20223215
• Il recettore lega i dimeri della beta 2-glicoproteina I, potenzialmente sopprimendo l'aggregazione piastrinica nel sistema vascolare. Riferimenti correlati: PMID:12807892
• LRP8 è altamente espresso nel segmento iniziale dell'epididimo, dove regola le proteine essenziali per la maturazione degli spermatozoi.
• Agisce come recettore per il virus della foresta Semliki e per il virus dell'encefalite trasmessa da zecche, mediando l'attacco e l'internalizzazione cellulare virale.
• A livello subcellulare, LRP8 si localizza sulla membrana cellulare e può essere secreto; funge anche da recettore endocitico.
• È espresso prevalentemente nel cervello e nella placenta, con ulteriore espressione nelle piastrine e nelle cellule megacariocitiche, ma è assente nel fegato.
• LRP8 contiene domini simili all'EGF, siti di legame del calcio, legami disolfuro e subisce modifiche post-traduzionali tra cui glicosilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide C-terminale (aminoacidi 900–terminale C); pertanto, l'anticorpo può riconoscere le isoforme a lunghezza intera e C-terminali, ma considerare la potenziale mascheratura dell'epitopo negli assay basati su cellule.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di ~106 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. acrilamide all'8%) e validare utilizzando lisati di tessuto umano o di ratto noti per esprimere LRP8, come il cervello o la placenta.
• Nell'immunofluorescenza su sezioni paraffinate (IF-P) e nell'immunoistochimica su sezioni paraffinate (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene (es. tampone citrato pH 6.0 o tampone EDTA pH 9.0) dovrebbero essere ottimizzate per i tipi di tessuto che esprimono LRP8.
• Per l'ELISA, testare la compatibilità della coppia di anticorpi se utilizzata in assay sandwich, poiché la natura policlonale può fornire alta avidità ma potrebbe reagire con recettori correlati come VLDLR.
• Dato che LRP8 è espresso nel cervello e nei tessuti riproduttivi, includere appropriati controlli positivi (es. lisati di cervello di topo o ratto) e controlli negativi (es. tessuto epatico, che non esprime il recettore) per confermare la specificità.
• Considerato il ruolo nell'ingresso virale, l'anticorpo può essere esplorato negli studi di infezione, ma confermare la reattività crociata con le proteine virali o con le linee cellulari infette.

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