Anticorpo Monoclonale Anti-Apolipoproteina B (ApoB) per WB ed ELISA - P04114

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Apolipoproteina B

• L'ApoB esiste in due isoforme principali: ApoB-100 (lunghezza completa, 516 kDa) e ApoB-48 (troncata, 48% dell'N-terminale), prodotta tramite editing dell'RNA nell'intestino.
• L'ApoB-100 è un componente proteico principale delle lipoproteine a densità molto bassa (VLDL) e delle lipoproteine a bassa densità (LDL), mentre l'ApoB-48 si trova nei chilomicroni.
• L'ApoB-100 funge da ligando per il recettore delle LDL (recettore apoB/E), mediando l'assorbimento cellulare e la clearance del colesterolo LDL.
• A livello subcellulare, l'ApoB si localizza nel citoplasma, viene secreta nel flusso sanguigno e si associa a goccioline lipidiche durante l'assemblaggio delle lipoproteine.
• La proteina subisce ampie modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione, palmitoilazione e glicosilazione, e contiene ponti disolfuro critici.
• Le varianti genetiche in APOB sono associate ad aterosclerosi, ipercolesterolemia familiare e altri disturbi lipidici.
• Parole chiave che riflettono il suo ruolo biologico: metabolismo del colesterolo, trasporto lipidico, legame all'eparina e coinvolgimento in malattie.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (residui 50-150) è presente sia in ApoB-100 che in ApoB-48; pertanto l'anticorpo potrebbe rilevare entrambe le isoforme nei campioni rilevanti.
• Per il Western blot, utilizzare gel di poliacrilammide a bassa percentuale (es. 4–6%) e tempi di trasferimento prolungati per adattarsi all'alto peso molecolare (516 kDa) di ApoB-100.
• Validare la specificità con appropriati controlli positivi (es. fegato umano o plasma) e negativi, e confermare la reattività crociata con campioni di ratto come indicato.
• Nelle applicazioni ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo per i ruoli di cattura o rilevamento utilizzando ApoB ricombinante o LDL purificata come antigene.

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