Anticorpo policlonale anti-Apolipoproteina D (APOD) per IHC-P ed ELISA - P05090

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'apolipoproteina D

• L'apolipoproteina D (APOD) è una glicoproteina secreta di 21 kDa appartenente alla famiglia delle lipocaline, identificata per la prima volta nelle lipoproteine ad alta densità (HDL) del plasma umano.
• APOD partecipa a un complesso macromolecolare con la lecitina-colesterolo aciltransferasi (LCAT) ed è probabilmente coinvolta nel trasporto e nel legame della bilinina.
• La proteina può trasportare una varietà di ligandi idrofobici in diversi contesti fisiologici, suggerendo un ruolo nel metabolismo lipidico e nella neuroprotezione.
• APOD è prevalentemente secreta ed è espressa in numerosi tessuti, tra cui fegato, intestino, pancreas, reni, placenta, ghiandole surrenali, milza, cervello fetale e lacrime.
• Strutturalmente, APOD contiene ponti disolfuro conservati e una modificazione con acido pirrolidone carbossilico, che contribuiscono alla sua stabilità e funzione.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione e la proteina matura è priva del peptide segnale, con un peso molecolare calcolato di circa 21 kDa.
• In quanto componente del proteoma di riferimento, APOD è stata ampiamente caratterizzata mediante determinazione della struttura 3D e sequenziamento diretto della proteina, facilitando la ricerca sui biomarcatori e sulla diagnostica.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 21–189 dell'APOD umana matura e copre la maggior parte del dominio di legame del ligando; questo design può favorire il rilevamento delle conformazioni native e parzialmente denaturate.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), considerare protocolli di recupero antigenico adatti alle proteine secrete; un tampone citrato delicato (pH 6,0) e un riscaldamento moderato possono migliorare l'esposizione dell'epitopo nelle sezioni incluse in paraffina.
• Nelle applicazioni ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo monoclonale di cattura potrebbe migliorare la specificità del test; ottimizzare le condizioni di rivestimento e blocco utilizzando la proteina ricombinante come standard di riferimento.
• Data la natura secreta di APOD, la preparazione dei campioni da lisati tissutali o fluidi biologici dovrebbe includere inibitori delle proteasi appropriati per preservare l'integrità della proteina.
• Validare la specificità della colorazione confrontando le intensità del segnale tra tessuti noti per esprimere livelli elevati (ad es. fegato e placenta) e bassi di APOD e includere un controllo negativo con IgG di coniglio preimmune.

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