Anticorpo Monoclonale Anti-APRT di Coniglio (Convalidato KD) per WB, IF/ICC, ELISA - P07741

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di APRT

• L'adenina fosforibosiltransferasi (APRT) catalizza la sintesi di recupero di AMP da adenina e 5-fosforibosil 1-pirofosfato (PRPP), una reazione energeticamente meno costosa della biosintesi de novo delle purine.
• Questo enzima fornisce una via alternativa per mantenere i pool di nucleotidi adenilati, particolarmente importante nei tessuti con elevato fabbisogno energetico o capacità di sintesi de novo limitata.
• APRT appartiene alla famiglia delle purina/pirimidina fosforibosiltransferasi ed è evolutivamente conservata tra le specie.
• La proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma, in linea con il suo ruolo nel metabolismo nucleotidico citoplasmatico.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare l'attività o la stabilità dell'enzima; lo splicing alternativo produce varianti trascrizionali multiple.
• Le mutazioni nel gene APRT sono associate alla carenza di adenina fosforibosiltransferasi, un disturbo che porta a urolitiasi da 2,8-diidrossiadenina e malattia renale cronica (parola chiave variante di malattia).
• Il peso molecolare dell'isoforma canonica è di circa 19,6 kDa, coerente con la banda osservata a 20 kDa nel Western blot.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende l'intera sequenza di APRT umano (residui 1–180), suggerendo il riconoscimento delle forme native e denaturate; convalidare nei sistemi di campioni rilevanti.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda intorno a 20 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e considerare controlli di caricamento per l'analisi quantitativa.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, si dovrebbe osservare una colorazione citoplasmatica; controlli come linee cellulari knockout per APRT possono aiutare a confermare la specificità.
• Le prestazioni in ELISA possono dipendere dalle condizioni di rivestimento e dalla diluizione dell'anticorpo; si raccomanda l'ottimizzazione.
• La reattività incrociata con APRT di topo e ratto è stata confermata, ma l'omologia di sequenza suggerisce un possibile riconoscimento di altre specie mammifere; verificare se utilizzato al di fuori di umano, topo o ratto.

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