Anticorpo policlonale coniglio anti-APRT per WB ed ELISA - P07741

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'APRT

• APRT codifica per l'adenina fosforibosiltransferasi, un enzima della via di salvataggio delle purine. L'isoforma canonica è di circa 19,6 kDa e lo splicing alternativo genera varianti aggiuntive.
• L'enzima catalizza la conversione di adenina e 5-fosforibosil-1-pirofosfato (PRPP) in AMP e pirofosfato, una reazione che è energeticamente meno costosa della sintesi de novo di AMP.
• APRT appartiene alla famiglia delle fosforibosiltransferasi puriniche/pirimidiniche ed è fondamentale per il riciclo dell'adenina derivante dalla dieta e dal turnover degli acidi nucleici.
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica, coerente con il suo ruolo nel salvataggio dei nucleotidi citoplasmatici.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono modulare l'attività o la stabilità dell'enzima.
• Le variazioni genetiche in APRT sono associate alla carenza di adenina fosforibosiltransferasi, un disturbo che porta a urolitiasi da 2,8-diidrossiadenina e insufficienza renale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–180) dell'APRT umana, che condivide un'alta omologia con l'APRT murina, supportando la reattività incrociata osservata.
• Questo anticorpo policlonale può rilevare multiple isoforme APRT a causa dello splicing alternativo; si consiglia di verificare il peso molecolare atteso (~20 kDa) nel proprio sistema campione.
• Per il Western blot, includere appropriati controlli negativi e positivi (es. lisati con sovraespressione di APRT o tessuti con livelli di espressione noti).
• Per l'ELISA, assicurare la compatibilità del rivestimento e considerare l'abbinamento con un sistema di rilevamento secondario ottimizzato per anticorpi policlonali di coniglio.
• Data la localizzazione citoplasmatica, si raccomandano tamponi di lisi delicati per un'estrazione proteica efficiente.

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