Anticorpo Policlonale Anti-ARF6 per WB, IF/ICC, ELISA - P62330

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ARF6

• ARF6 (fattore di ADP-ribosilazione 6) è una piccola GTPasi della famiglia ARF, codificata dal gene ARF6, che cicla tra stati inattivi legati al GDP e attivi legati al GTP per regolare molteplici aspetti del traffico intracellulare di membrana.
• Come attore centrale nel riciclo endocitico, ARF6 controlla il ritorno del carico internalizzato dagli endosomi di riciclo alla membrana plasmatica, facilitando il rimodellamento del citoscheletro e la migrazione cellulare (PubMed:11266366, PubMed:16737952, PubMed:18400762).
  Riferimenti correlati: PMID:11266366 PMID:16737952 PMID:18400762
• Nella sua forma legata al GTP, ARF6 media il trasporto di proteine palmitoilate dalla rete trans-Golgi alla membrana plasmatica, una funzione critica per la secrezione polarizzata e la consegna dei recettori di superficie cellulare (PubMed:37461827).
  Riferimenti correlati: PMID:37461827
• ARF6 è essenziale per la citochinesi mitotica, localizzandosi al solco di divisione e al corpo mediano per garantire una corretta separazione delle cellule figlie.
• La proteina modula attivamente la morfologia neuronale regolando lo sviluppo delle spine dendritiche, la ramificazione e l'estensione dei filopodi, e potenzia la crescita dei neuriti attraverso l'interazione con la proteina adattatrice APBB1 (PubMed:14978216, PubMed:36250347).
  Riferimenti correlati: PMID:14978216 PMID:36250347
• Durante la polarizzazione epiteliale, ARF6 governa il rimodellamento giunzionale controllando i livelli di superficie delle proteine delle giunzioni aderenti come CDH1, e svolge un ruolo nel riciclo di NTRK1 dagli endosomi precoci (PubMed:36017701).
  Riferimenti correlati: PMID:36017701
• ARF6 è anche implicato nella patogenesi microbica: attiva allostericamente la tossina del colera e facilita l'ingresso dell'enterovirus 71 nelle cellule endoteliali cerebrali.
• Espressa in modo ubiquitario con livelli più elevati nel cuore, nella substantia nigra e nel rene, ARF6 si localizza in più compartimenti di membrana inclusa la membrana plasmatica, gli endosomi, il Golgi, ed è modificata post-traduzionalmente mediante miristoilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 1–175 dell'ARF6 umano, che includono il dominio di legame per il GTP N-terminale; l'anticorpo policlonale risultante può rilevare sia le conformazioni legate al GDP che al GTP.
• L'analisi Western blot dovrebbe mostrare una banda a circa 20 kDa; utilizzare lisati da linee cellulari o tessuti umani, di topo o ratto come controlli positivi.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, la colorazione per ARF6 è attesa a livello della membrana plasmatica, degli endosomi di riciclo e di vescicole intracellulari; le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate per target associati alla membrana.
• Le applicazioni ELISA possono essere sviluppate utilizzando proteina ARF6 ricombinante o frammenti peptidici; considerare l'inclusione di controlli negativi per valutare il legame aspecifico.

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