Anticorpo policlonale coniglio anti-ARFRP1 per WB e ELISA - Q13795

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'ARFRP1

• ARFRP1 (proteina correlata al fattore di ADP-ribosilazione 1), nota anche come ARP o ARL18, è una piccola GTPasi della famiglia ARF coinvolta nel traffico intracellulare di membrana.
• Funziona come GTPasi localizzata alla rete del trans-Golgi (TGN) che regola criticamente l'orientamento delle proteine, controllando specificamente il targeting di ARL1 e dei suoi effettori alla TGN.
• ARFRP1 è necessario per la lipidazione dei chilomicroni nell'intestino e la lipidazione delle lipoproteine a molto bassa densità (VLDL) nel fegato, evidenziando il suo ruolo nel metabolismo lipidico.
• La proteina è principalmente localizzata all'apparato di Golgi e alla rete del trans-Golgi, coerente con il suo ruolo nel traffico post-Golgi.
• ARFRP1 umano è espresso ubiquitariamente, essendo presente nella maggior parte dei tessuti, il che si allinea con la sua funzione cellulare fondamentale.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione e il gene subisce splicing alternativo, potenzialmente generando multiple isoforme.
• Il peso molecolare è di circa 23 kDa (22,6 kDa previsto dalla sequenza) e la proteina contiene domini di legame del GTP e dei nucleotidi conservati tipici della superfamiglia Ras.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un frammento ricombinante che copre gli aminoacidi N-terminali 1-201 dell'ARFRP1 umano, che include essenzialmente la proteina a lunghezza intera. Questa progettazione può migliorare il rilevamento di multiple isoforme e forme denaturate/ridotte nel Western blot.
• Per il Western blot, considerare di titolare la concentrazione dell'anticorpo, poiché ARFRP1 è una proteina associata al Golgi a bassa abbondanza. Una diluizione iniziale di 1:500–1:2000 è tipica per gli anticorpi policlonali, ma si raccomanda l'ottimizzazione.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la rilevazione diretta dell'antigene o come coppia di cattura/rilevamento con un anticorpo monoclonale adatto; validare la compatibilità con il formato specifico del saggio.
• Dato che ARFRP1 è conservato tra umano, mouse e ratto, questo anticorpo può servire come strumento per studi comparativi tra queste specie. Validare la reattività crociata nei tipi di campione pertinenti.
• Per mantenere la stabilità, evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento. Aliquotare e conservare a -20°C o -80°C per la conservazione a lungo termine.

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