Anticorpo monoclonale coniglio anti-Argonaute-2 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9UKV8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Argonaute-2

• La proteina Argonaute-2 (AGO2, nota anche come eIF2C2) è il componente catalitico del complesso di silenziamento indotto da RNA (RISC) essenziale per l'interferenza RNA (RNAi).
• AGO2 si lega a brevi RNA guida (miRNA o siRNA) per dirigere il RISC verso mRNA complementari, portando al silenziamento genico post-trascrizionale attraverso il clivaggio endonucleolitico (slicing) o la repressione traduzionale, a seconda della complementarietà.
• Media l'inibizione traduzionale legando il cappuccio dell'mRNA, impedendo il reclutamento di eIF4E, e tramite l'interazione con EIF6, che blocca l'unione delle subunità ribosomiali; gli mRNA mirati si accumulano nei corpi P citoplasmatici.
• AGO2 può anche aumentare la traduzione di specifici mRNA (es. TNF) in condizioni di privazione siero, e partecipa al silenziamento genico trascrizionale (TGS) mirando alle regioni del promotore con RNA antisenso.
• Durante l'infezione da SARS-CoV-2, AGO2 si associa al piccolo RNA virale simile a miRNA CoV2-miR-O7a per reprimere mRNA dell'ospite come BATF2, contribuendo all'evasione della risposta interferonica.
• A livello subcellulare, AGO2 si localizza nel citoplasma (inclusi i corpi P) e nel nucleo.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, idrossilazione, nitrazione e ubiquitinazione; richiede magnesio o manganese per l'attività endonucleasica.
• Le parole chiave evidenziano i suoi ruoli nel legame RNA, nel complesso ribonucleoproteico, nell'interazione ospite-virus e nell'associazione con malattie (disabilità intellettiva).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico di una regione conservata (amminoacidi 101-200), coerente con il rilevamento di AGO2 umano, murino e di ratto; tuttavia, convalidare sempre la specificità nel sistema campione pertinente.
• Per il Western blot (WB), la banda prevista è di ~97 kDa; includere appropriati controlli positivi e negativi e considerare l'uso di un controllo di carico per la normalizzazione.
• Per immunochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare il recupero dell'antigene e le diluizioni dell'anticorpo utilizzando tessuti o cellule noti per esprimere AGO2.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere un'ulteriore ottimizzazione; considerare titrazioni a scacchiera per determinare le condizioni ottimali di rivestimento e rilevamento.

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