Anticorpo policlonale coniglio anti-ARHGEF2 per WB ed ELISA - Q92974

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'ARHGEF2

• ARHGEF2, noto anche come GEF-H1, Lfc o p40, è un fattore di scambio nucleotidico guaninico Rho che catalizza lo scambio GDP/GTP sulle Rho-GTPasi, svolgendo ruoli fondamentali nella dinamica del citoscheletro, nella motilità cellulare e nella polarizzazione.
• Regola la funzione di barriera epiteliale modulando le giunzioni strette e la permeabilità paracellulare; la sovraespressione aumenta la permeabilità e la sua attività è controllata dal legame ai microtubuli.
• ARHGEF2 funge da sensore immunitario innato critico: collabora con NOD1 per rilevare gli effettori microbici durante l'invasione dei patogeni (es. Shigella flexneri) e media l'attivazione di NF-kappaB tramite RHOA e RIPK2.
• Nei macrofagi, ARHGEF2 trasduce i segnali da NOD2 a RIPK2 dopo stimolazione con peptidoglicano, portando alla fosforilazione di RIPK2 da parte della chinasi Src e alla conseguente attivazione di NF-kappaB, che guida la secrezione di IL-6 e TNF.
• Mentre uno studio iniziale suggeriva un'attività di scambio nucleotidico verso le Rac-GTPasi (PubMed:9857026), ARHGEF2 attiva principalmente le Rho-GTPasi e potrebbe invece stimolare l'attività corticale delle Rac. Riferimenti correlati: PMID:9857026
• ARHGEF2 contribuisce allo sviluppo neuronale, inclusa la divisione e la differenziazione delle cellule progenitrici (PubMed:28453519) e la migrazione dei neuroni precerebellari (Per somiglianza). Riferimenti correlati: PMID:28453519
• A livello subcellulare, ARHGEF2 si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro (microtubuli, fuso mitotico), nelle giunzioni strette, nell'apparato di Golgi, nella membrana a frastaglio e nelle vescicole citoplasmatiche, coerente con i suoi ruoli di regolazione dinamica.
• La proteina subisce modificazioni post-traduzionali come acetilazione e fosforilazione e contiene domini caratteristici tra cui un tandem DH/PH e un motivo a dito di zinco.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, utilizzare condizioni riducenti e un lisato cellulare umano positivo (es. HeLa, HEK293) per rilevare l'ARHGEF2 endogeno al peso molecolare atteso di 112 kDa; convalidare nel proprio specifico modello sperimentale.
• Essendo un anticorpo policlonale, può riconoscere più epitopi aumentando la sensibilità, ma le variazioni tra lotti dovrebbero essere monitorate mediante test paralleli di uno standard di riferimento.
• Nell'ELISA, questo anticorpo può essere impiegato come reagente di cattura o di rilevamento; titolare l'anticorpo e ottimizzare le condizioni di blocco/rilevamento per il formato del proprio saggio.
• L'immunogeno è stato generato contro un peptide C-terminale (aa 850–950), suggerendo una reattività sia con la proteina a lunghezza intera che con potenziali varianti di splicing C-terminali; confermare la specificità tramite controlli knockout o siRNA.

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