Anticorpo policlonale coniglio anti-ARMET/ARP/MANF per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P55145

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MANF (ARMET/ARP)

• Il fattore neurotrofico derivato dagli astrociti mesencefalici (MANF), noto anche come proteina ricca di arginina (ARMET/ARP), è un fattore neurotrofico secreto che promuove la sopravvivenza dei neuroni dopaminergici e modula la trasmissione GABAergica nella substantia nigra. Riferimenti correlati: PMID:12794311
• MANF inibisce la proliferazione cellulare e la morte cellulare indotta da stress del reticolo endoplasmatico (ER). In condizioni normali viene trattenuto nel reticolo endoplasmatico/reticolo sarcoplasmatico attraverso l'associazione con la chaperone HSPA5/BiP e viene secreto in caso di stress del RE. Riferimenti correlati: PMID:18561914, PMID:22637475, PMID:29497057
• Il MANF secreto si lega al 3-O-solfogalattosilceramide (solfatide) sulle membrane delle cellule bersaglio, promuovendo l'assorbimento cellulare tramite endocitosi, necessario per il suo ruolo nell'alleviare lo stress del RE e la tossicità cellulare in condizioni ipossiche. Riferimenti correlati: PMID:29497057
• MANF è essenziale per lo sviluppo polmonare embrionale, l'architettura della polpa bianca splenica postnatale, l'ossificazione endocondrale e la riparazione del muscolo scheletrico, dove regola le transizioni fenotipiche dei macrofagi per limitare l'infiammazione.
• A livello subcellulare, MANF localizza nel lume del reticolo endoplasmatico e nel lume del reticolo sarcoplasmatico in condizioni normali e viene secreto in risposta allo stress.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di ponti disolfuro, fosforilazione e aggiunta di acido sialico. MANF funziona nella risposta alla proteina srotolata (UPR) e nelle vie di risposta allo stress.
• Le mutazioni in MANF sono associate a sordità, diabete mellito e nanismo, sottolineando i suoi diversi ruoli fisiologici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Design dell'immunogeno: L'anticorpo è stato prodotto contro una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 25-182 di MANF umano, coprendo il polipeptide maturo. Questa regione è ben conservata tra umano, topo e ratto, supportando la reattività incrociata.
• Western blot (WB): Il peso molecolare previsto è 21 kDa; tuttavia, considerare che le modifiche post-traduzionali (es. glicosilazione) possono causare lievi spostamenti delle bande. Validare con controlli positivi appropriati e considerare modelli di induzione dello stress del RE per valutare la secrezione regolata.
• Immunochimica (IHC-P) e immunocitochimica (IF/ICC): A causa della secrezione e della localizzazione nel RE di MANF, assicurarsi di un'adeguata permeabilizzazione e includere marcatori del RE per studi di co-localizzazione. Ottimizzare il recupero dell'antigene per sezioni incluse in paraffina.
• Immunoprecipitazione (IP) ed ELISA: La natura policlonale fornisce una solida capacità di cattura e rilevamento. Per ELISA a sandwich, considerare l'abbinamento con un anticorpo monoclonale che riconosce un epitopo distinto.
• Nota generale: Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata nel sistema di saggio specifico. Includere sempre controlli di isotipo e negativi appropriati.

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