Anticorpo policlonale di coniglio Anti-ASAH1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13510

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ASAH1 (Acid Ceramidase)

• ASAH1 codifica per un enzima lisosomiale che idrolizza le ceramidi in sfingosina e acidi grassi liberi a pH acido, con una maggiore efficienza catalitica verso le C12-ceramidi (PubMed:10610716, PubMed:15655246, PubMed:7744740). Riferimenti correlati: PMID:10610716 PMID:15655246 PMID:7744740
• L'enzima catalizza anche la reazione inversa, sintetizzando ceramidi da sfingosina e acidi grassi, con preferenza per la sfingosina D-eritro e per gli acidi grassi C12 o C14 (PubMed:12764132, PubMed:12815059). Riferimenti correlati: PMID:12764132 PMID:12815059
• ASAH1 possiede anche attività N-aciletanolamine idrolasi, contribuendo alla regolazione delle molecole bioattive di segnalazione lipidica (PubMed:15655246). Riferimenti correlati: PMID:15655246
• Regolando i livelli di ceramide, sfingosina e sfingosina-1-fosfato nell'epidermide, ASAH1 media la differenziazione indotta da calcio dei cheratinociti epidermici (PubMed:17713573). Riferimenti correlati: PMID:17713573
• ASAH1 regola indirettamente l'apoptosi indotta dal fattore di necrosi tumorale (TNF) attraverso l'equilibrio tra ceramide e sfingosina (Per similarità).
• Nelle cellule della cortex surrenale, ASAH1 può regolare direttamente la steroidogenesi legandosi al recettore nucleare NR5A1 e regolando negativamente la sua attività trascrizionale (PubMed:22261821). Riferimenti correlati: PMID:22261821
• La localizzazione subcellulare include il lisosoma, ma ASAH1 si può trovare anche nel nucleo, nel citoplasma e viene secreta.
• ASAH1 è ampiamente espressa, con una espressione più elevata nel cuore.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 140–389) copre una grande porzione della sequenza matura dell'acidoceramidasi; questo progetto può produrre anticorpi che riconoscono sia il precursore full-length che le forme processate. Si consiglia di convalidare la rilevazione delle isoforme nel proprio sistema di campioni.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 45 kDa, ma il processamento può generare frammenti più piccoli. Utilizzare condizioni riducenti e verificare il pattern delle bande con controlli appropriati, specialmente in lisati di origine umana, di topo o ratto.
• Negli esperimenti IF/ICC, devono essere determinate le condizioni ottimali di fissazione e permeabilizzazione per preservare la localizzazione lisosomiale. La co-colorazione con marcatori di organelli può aiutare a confermare la specificità.
• Quando si utilizza questo anticorpo in ELISA, considerare la sua natura policlonale per il reagente di cattura o di rilevazione; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale può migliorare il rapporto segnale/rumore. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e blocco per il formato specifico del tuo saggio.

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