Anticorpo policlonale di coniglio anti-ASAH2 per WB, ELISA - Q9NR71

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della ceramidasi neutra (ASAH2)

• ASAH2 codifica la ceramidasi neutra, un membro della famiglia delle ceramidasi, nota anche come BCDase, LCDase, N-CDase e HNAC1.
• Funziona come ceramidasi della membrana plasmatica, idrolizzando le ceramidi in sfingosina e acidi grassi liberi a pH neutro, e può anche catalizzare la reazione inversa di sintesi. Riferimenti correlati: PMID:10781606, PMID:16229686, PMID:26190575, PMID:11278489, PMID:17475390
• Insieme alla sfingomielinasi, partecipa alla degradazione della sfingomielina producendo i lipidi bioattivi sfingosina e sfingosina-1-fosfato. Riferimenti correlati: PMID:16061940
• Svolge un ruolo nella digestione degli sfingolipidi alimentari nel tratto intestinale (per similarità).
• Le ceramidi, la sfingosina e la sfingosina-1-fosfato regolano processi cellulari chiave quali proliferazione, apoptosi e differenziazione. Riferimenti correlati: PMID:15946935, PMID:19345744, PMID:24798654
• La localizzazione subcellulare comprende la membrana plasmatica (raft/caveole), l'apparato di Golgi, i mitocondri e la secrezione nello spazio extracellulare (esosomi).
• È espresso principalmente nell'intestino, con ulteriore espressione nel rene, nel muscolo scheletrico e nel cuore; si noti che il rilevamento ubiquitario può essere influenzato dal paralogo ASAH2B. Riferimenti correlati: PMID:17334805, PMID:10781606
• Contiene caratteristiche strutturali quali ponti disolfuro, siti di N-glicosilazione, un dominio di legame dello zinco e siti di fosforilazione/ubiquitinazione, che riflettono la sua regolazione e associazione alla membrana.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 80–340, una regione all'interno del dominio extracellulare di ASAH2. Per il Western blot (WB), si prevede una banda di circa 86 kDa; si raccomandano condizioni riducenti e denaturanti per risolvere accuratamente la proteina glicosilata.
• Per le applicazioni ELISA, si consiglia di utilizzare la proteina ricombinante immunogena come controllo positivo e di ottimizzare le condizioni di rivestimento e i reagenti di rilevamento per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore.
• Data la natura policlonale, è necessario verificare la consistenza tra i diversi lotti; inoltre, l'anticorpo può riconoscere più isoforme o prodotti di scissione. Si consiglia di validarlo in lisati di tessuti o cellule pertinenti umani, di topo o di ratto.
• I campioni arricchiti in sfingolipidi (ad esempio tessuto intestinale o renale) possono offrire un rilevamento endogeno ottimale; tuttavia, possono essere necessari passaggi di cross-adsorbimento o blocco per ridurre il legame aspecifico in matrici complesse.

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