Anticorpo policlonale di coniglio anti-ASC/TMS1 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9ULZ3

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ASC/TMS1

• La proteina simile a speck associata all'apoptosi contenente un CARD (ASC/TMS1) è un mediatore chiave dell'apoptosi e dell'infiammazione. Promuove l'apoptosi mediata dalle caspasi che coinvolge prevalentemente la caspasi-8 e anche la caspasi-9 in un modo probabilmente specifico per il tipo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11103777, PMID:12646168
• L'ASC funge da adattatore integrale nell'assemblaggio di vari infalmasomi (NLRP1, NLRP2, NLRP3, NLRP6, AIM2 e probabilmente IFI16), che reclutano e attivano la caspasi-1 portando alla lavorazione e alla secrezione di citochine pro-infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:15030775, PMID:16982856, PMID:17349957
• Attraverso i suoi domini pirina e CARD, l'ASC media interazioni omotipiche che nucleano la formazione di filamenti di caspasi-1, agendo come piattaforma per la polimerizzazione della caspasi-1 e la piroptosi dei macrofagi. Riferimenti correlati: PMID:14499617, PMID:19234215, PMID:24630722
• L'ASC è localizzata nel citoplasma, nucleo, reticolo endoplasmatico, mitocondri e membrana dell'apparato di Golgi; viene reclutata negli infalmasomi dopo l'attivazione.
• Modula anche l'attivazione trascrizionale di citochine e chemochine indipendentemente dall'infalmasoma, coinvolgendo le vie di segnalazione AP-1, NF-kappa-B, MAPK e caspasi-8. Riferimenti correlati: PMID:12486103, PMID:16585594
• Ampiamente espressa a bassi livelli, rilevata nei leucociti del sangue periferico, polmone, intestino tenue, milza e colon; l'espressione è confermata nelle cellule epiteliali polmonari a livello proteico. Riferimenti correlati: PMID:23229815
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e la coniugazione Ubl (legame isopeptidico); la proteina è implicata nella soppressione tumorale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre i 91 amminoacidi N-terminali, che includono il dominio pirina (PYD); l'anticorpo può riconoscere sia la forma a lunghezza intera che qualsiasi isoforma N-terminale. Per le applicazioni che richiedono il rilevamento di isoforme specifiche, si consiglia la convalida con controlli appropriati.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda primaria intorno a 22 kDa; tuttavia, potenziali modifiche post-traduzionali o frammenti di clivaggio possono produrre bande aggiuntive; dovrebbero essere utilizzati controlli di carico e marcatori del peso molecolare.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), le condizioni di permeabilizzazione e fissazione dovrebbero essere ottimizzate, poiché l'ASC si localizza in più compartimenti subcellulari. I pattern di colorazione nucleare e citoplasmatica possono variare a seconda dello stato di attivazione.
• Le applicazioni di immunoprecipitazione (IP) ed ELISA sono state convalidate; considerare l'uso di lisati freschi e l'inclusione di inibitori delle proteasi per preservare le interazioni proteiche.
• È riportata la reattività crociata con topo e ratto; tuttavia, l'omologia di sequenza dovrebbe essere verificata per gli studi in queste specie e si consiglia di condurre esperimenti pilota.

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