Anticorpo policlonale coniglio Anti-ASMT per WB, IHC-P, ELISA - P46597

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'ASMT

• ASMT (Acetilserotonina O-metiltransferasi), nota anche come Idrossiindolo O-metiltransferasi (HIOMT), è l'enzima chiave che catalizza il passaggio finale della biosintesi della melatonina: il trasferimento di un gruppo metilico dalla S-adenosil-L-metionina sulla N-acetilserotonina per produrre melatonina (N-acetil-5-metossitriptamina).
• Il gene ASMT subisce splicing alternativo, risultando in varianti di trascrizione multiple che codificano diverse isoforme proteiche.
• A livello proteico, l'ASMT è espressa prevalentemente nella ghiandola pineale, dove svolge un ruolo critico nella regolazione dei ritmi circadiani e della riproduzione stagionale attraverso la secrezione di melatonina.
• Nella retina, è stata rilevata un'espressione mRNA molto bassa, ma la proteina ASMT è assente, indicando una regolazione tessuto-specifica di questo enzima. Riferimenti correlati: PMID:7989373 PMID:8574683
• ASMT appartiene alla super famiglia delle metiltransferasi e richiede la S-adenosil-L-metionina come donatore di metile per la sua attività catalitica.
• La proteina è annotata sotto il metabolismo dei lipidi, evidenziando un potenziale legame tra la sintesi della melatonina e più ampie vie metaboliche.
• Studi strutturali (evidenziati da annotazioni sulla struttura 3D) hanno rivelato l'architettura del sito attivo dell'enzima, facilitando la ricerca sul suo meccanismo catalitico e la progettazione di inibitori.
• La proteomica basata sulla spettrometria di massa ha confermato l'espressione dell'ASMT nella ghiandola pineale, supportando la sua utilità come biomarcatore della funzione pineale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1-298 dell'ASMT umana (NP_001164510.1). Questa sequenza quasi completa è probabilmente in grado di generare anticorpi che riconoscono molteplici epitopi lineari, rendendola adatta per il rilevamento della proteina denaturata nel Western blot.
• Per IHC-P, considerare l'ottimizzazione delle condizioni di recupero dell'antigene e della diluizione dell'anticorpo, poiché gli anticorpi policlonali possono esibire un background più elevato in tessuti inclusi in paraffina e fissati in formaldeide.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può rilevare ASMT ricombinante o nativa; tuttavia, la reattività crociata con altre metiltransferasi dovrebbe essere validata, specialmente quando si testano campioni di specie con alta omologia di sequenza.
• Quando si utilizza questo anticorpo in tessuti di topo o ratto, confermare la reattività crociata tramite allineamento di sequenza o titolazione preliminare, dato che l'immunogeno è di origine umana.
• Per WB, ci si aspetta una banda a circa 38 kDa; potrebbero apparire bande aggiuntive da isoforme o modifiche post-traduzionali e dovrebbero essere verificate con controlli appropriati.

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